Cd3 cd8 t citotoksičen. Kaj so limfociti v krvnem testu, normalni in nenormalni

Kakšna je norma limfocitov v krvi? Ali obstaja razlika v njihovem številu med moškimi in ženskami, otroki in odraslimi? Zdaj vam bomo vse povedali. Raven limfocitov v krvi se določi med splošnimi kliničnimi testi za primarno diagnozo prisotnosti nalezljivih bolezni, alergijskih reakcij, pa tudi, če je potrebno, za oceno stranskih učinkov zdravil in učinkovitosti izbranega zdravljenja.

Določanje velikosti aktiviranih limfocitov ni rutinska laboratorijska preiskava in se izvaja samo ob indikacijah.

Ta analiza se ne izvaja ločeno od splošnega imunološkega pregleda bolnika ali določanja drugih levkocitnih celic (eozinofilcev, monocitov, limfocitov v krvi itd.), saj sama po sebi nima diagnostične vrednosti.

Limfociti limfa- to so bele krvne celice (vrsta levkocitov), ​​s pomočjo katerih se uresničuje zaščitna funkcija človeškega telesa pred tujimi povzročitelji okužb in lastnimi mutiranimi celicami.

Limfociti abs je absolutno število dane vrste celice, določeno s formulo:

Skupno število levkocitov * Vsebnost limfocitov (%)/100

Aktivirane limfocite delimo na 3 podpopulacije:

• T-limfociti - zreli v timusu, so odgovorni za izvajanje celičnega tipa imunskega odziva (neposredna interakcija imunskih celic s patogeni). Delimo jih na T-pomočnike (sodelujejo pri antigenski predstavitvi celic, resnosti imunskega odziva in sintezi citokinov) in citotoksične T-limfocite (prepoznajo tuje antigene in jih uničijo zaradi sproščanja toksinov ali vnosa perforinov, ki poškodujejo celovitost citoplazemske membrane);
• Limfociti B - zagotavljajo humoralno imunost s proizvodnjo specifičnih beljakovinskih molekul - protiteles;
• Limfociti NK (naravne celice ubijalke) – raztapljajo celice, ki so okužene z virusi ali so podvržene maligni degeneraciji.

Znano je, da so limfociti v krvi sposobni sintetizirati številne antigene na svoji površini in vsak od njih je edinstven glede na svojo subpopulacijo in stopnjo nastajanja celic. Funkcionalna aktivnost takih celic je drugačna. V večini primerov so tarča drugih levkocitov v fazi imunofenotipizacije.

Grozd diferenciacije in njegove vrste

Oznaka grozda je umetno ustvarjena nomenklatura, ki dodeljuje številke različnim antigenom, ki nastajajo na površini limfocitov v krvi. Sinonimi za izraz: CD, CD-antigen ali CD-marker.

Med laboratorijsko diagnostiko ugotavljamo prisotnost označenih celic v splošni subpopulaciji belih krvničk z uporabo monoklonskih (identičnih) označenih protiteles (na osnovi fluorokroma). Pri interakciji protiteles s strogo specifičnimi antigeni CD nastane stabilen kompleks antigen-protitelo in je možno prešteti preostala prosta označena protitelesa in določiti število limfocitov v krvi.

Obstaja 6 vrst CD antigenskih skupin:

• 3 – značilnost T-limfocitov, sodeluje pri tvorbi signalnotransdukcijskega kompleksa vzdolž membrane;
• 4 – identificiran na več vrstah levkocitov, pomaga olajšati proces prepoznavanja tujih antigenov pri interakciji z MHC (major histoconscience complex) razreda 2;
• 8 – predstavljen na površini citotoksičnih T-, NK-celic, funkcionalnost je podobna prejšnjemu tipu grozdov, prepoznani so samo antigeni, povezani z MHC razreda 1;
• 16 – prisoten na različnih vrstah belih krvnih celic, je del receptorjev, odgovornih za aktivacijo fagocitoze in citotoksičnega odziva;
• 19 – komponenta B-limfocitov, potrebna za njihovo pravilno diferenciacijo in aktivacijo;
• 56 - proizvedeno na površini NK in nekaterih T celic, potrebno za zagotovitev njihove pritrditve na tkiva, prizadeta z malignimi tumorji.

Indikacije za študijo

Aktivirane limfocite v krvi otrok in odraslih določajo:

• diagnoza avtoimunskih bolezni, onkopatologij, alergijskih reakcij in njihove resnosti;
• diagnoza in nadzor zdravljenja akutnih nalezljivih bolezni;
• izvajanje diferencialne diagnoze virusnih in bakterijskih okužb;
• ocenjevanje stanja imunskega sistema (vključno s prisotnostjo imunskih pomanjkljivosti);
• ocena intenzivnosti imunskega odziva v primeru hudih okužb, ki so prešle v kronično obliko;
• celovit pregled pred in po obsežni operaciji;
• sum na zatiranje imunskega statusa zaradi genetske mutacije;
• nadzorovanje stopnje imunske napetosti med jemanjem imunosupresivov ali imunostimulansov.

Norma limfocitov v krvi

Število limfocitov v krvi se določi s pretočno citometrijo; obdobje študije je 2-3 dni, razen dneva odvzema biomateriala. Pomembno je pravilno razlagati dobljene rezultate, priporočljivo je k imunogramu priložiti zaključek imunologa. Končna diagnoza se postavi na podlagi vseh podatkov laboratorijskih in instrumentalnih preiskav ter klinične slike bolnika.

Ugotovljeno je, da se diagnostična vrednost znatno poveča pri ocenjevanju intenzivnosti imunosti osebe skozi čas z rednimi ponavljajočimi se testi.

Aktivirani limfociti v krvnem testu pri otroku in odraslem so različni, zato je treba pri interpretaciji rezultatov izbrati normalne (referenčne) vrednosti ob upoštevanju bolnikove starosti.

Tabela normalnega obsega limfocitov glede na starost

Tabela prikazuje vrednosti sprejemljivih norm limfocitov (posamezne subpopulacije) v krvi otrok in odraslih.

Odstopanje od referenčnih kazalcev

Bolniki se sprašujejo: kaj pomeni, če so limfociti v krvi višji ali nižji od običajnega? Upoštevati je treba, da je rahlo odstopanje od referenčnih vrednosti lahko posledica nepravilne priprave na analizo. V tem primeru je priporočljivo ponoviti študijo.

Prisotnost velikega števila atipičnih limfocitov v krvnem testu pri otroku ali odraslem kaže na patološki proces. Pomembno je ugotoviti, katera vrsta splošne subpopulacije belih krvnih celic odstopa od norme.

T limfociti

Povečanje T-limfocitov (CD3 + CD19-) opazimo v ozadju levkemije, akutnih ali kroničnih stopenj infekcijskega procesa, hormonskega neravnovesja, dolgotrajne uporabe zdravil in bioloških dodatkov, pa tudi med visoko telesno aktivnostjo in nosečnost. Če se merilo zmanjša, se domneva o poškodbi jeter (ciroza, rak), avtoimunskih patologijah, imunskih pomanjkljivostih ali imunosupresiji z zdravili.

T celice pomočnice

Koncentracija celic T-pomočnic (CD3 + CD4 + CD45 +) se znatno poveča med zastrupitvijo z berilijem, številnimi avtoimunskimi boleznimi in nekaterimi nalezljivimi okužbami. Zmanjšanje vrednosti je glavni laboratorijski znak sekundarne imunske pomanjkljivosti, opazimo pa ga lahko tudi pri jemanju steroidnih zdravil in cirozi jeter.

Povečanje T-citotoksičnih limfocitov

Razlogi za povečanje T-citotoksičnih limfocitov (CD3 + CD8 + CD45 +) so:

• takojšnja alergijska reakcija;
• avtoimunske patologije;
• limfoza;
• virusna infekcija.

Odstopanje od norme v manjši meri kaže na zatiranje naravne imunosti osebe.

B-limfociti (CD19 + CD3 -) se povečajo s hudim čustvenim ali fizičnim stresom, limfomom, avtoimunskimi boleznimi, pa tudi v primeru dolgotrajne zastrupitve s hlapi formaldehida. Reaktivni limfociti B se zmanjšajo, če migrirajo na mesto vnetnega procesa.

Dve vrsti naravnih celic ubijalk: CD3 - CD56 + CD45 + in CD3 - CD16 + CD45 + dosežeta svoje največje vrednosti v fazi regeneracije človeškega telesa po hepatitisu in nosečnosti, pa tudi pri nekaterih onkoloških, avtoimunskih in jetrnih patologijah. . Njihovo zmanjšanje prispevajo zloraba kajenja tobaka in steroidnih zdravil, pa tudi nekatere okužbe.

Kako se pripraviti na analizo?

Da bi dobili najbolj zanesljive rezultate, je treba pred darovanjem biomateriala dosledno upoštevati pravila priprave, saj so limfociti v krvi občutljivi na številne zunanje dejavnike (stres, zdravila). Biomaterial za študijo je serum venske krvi iz kubitalne vene.

1 dan pred dajanjem krvi mora bolnik prenehati piti alkohol in vse izdelke, ki vsebujejo alkohol, ter vsa zdravila. Če vitalnih zdravil ni mogoče preklicati, morate zdravnika obvestiti o njihovi uporabi. do osebja. Poleg tega je izključen fizični in čustveni stres, ki lahko povzroči zvišanje preučevanih meril.

Krv se daruje na prazen želodec, minimalni interval med postopkom odvzema biomateriala in zadnjim obrokom je 12 ur. V pol ure morate prenehati kaditi.

zaključki

Če povzamemo, je treba poudariti pomembne vidike:

• študija je glavna sestavina pri diagnosticiranju poškodb imunskega sistema;
• normalne vrednosti so izbrane glede na starost pregledanega bolnika;
• točnost pridobljenih podatkov ni odvisna le od pravilne izvedbe metodologije analize, temveč tudi od skladnosti z vsemi pravili za usposabljanje osebe same;
• Za končno diagnozo je nesprejemljivo uporabiti imunogram ločeno, saj lahko odstopanja od norme različnih subpopulacij celic imunskega sistema kažejo na številne podobne patologije. V tem primeru je predpisan dodaten pregled, ki vključuje niz testov: komponente komplementa C3 in C4, krožeči imunski kompleksi, pa tudi skupni imunoglobulini razredov A, G in M.
Več podrobnosti

Limfociti so pomembne celične strukture imunskega sistema in spadajo v skupino agranulociti. Zagotavljajo osnovno celično in humoralno imunost ter uravnavajo delovanje drugih elementov levkocitnega kompleksa.

Število takšnih celičnih elementov v perifernem krvnem sistemu je pomemben pokazatelj neposredne ocene trenutnega stanja splošne imunosti osebe.

Znižana raven limfocitov v krvi lahko kaže na prisotnost številnih bolezni, patoloških stanj in posameznih značilnosti bolnikovega telesa. V tem članku bomo poskušali razumeti, kaj to pomeni in kateri razlogi vodijo do nizke ravni limfocitov pri otrocih in odraslih.

Vloga limfocitov v telesu

Znanstveniki so izolirali več vrst limfocitov. Vsak od njih se razlikuje po načinu delovanja na patogene mikroorganizme.

1. T limfociti. Ta skupina je najštevilnejša. Razdeljen je še na 3 podvrste. Vsak od njih igra svojo vlogo. T-celice ubijalke ubijajo povzročitelje okužb, pa tudi spremenjene (tumorske) celice. Pomožne celice T izboljšajo imunost, medtem ko supresorske T celice zavirajo imunski odziv.
2. B limfociti. Njihovo število je 10-15% celotne koncentracije. Funkcije B-limfocitov so med najpomembnejšimi. Sestavljajo jih odpornost proti virusom, bakterijam in razvoj celične imunosti. Prav zaradi teh snovi je cepljenje učinkovito.
3. NK limfociti. Ta predpona je iz angleščine prevedena kot "naravni morilci". Delež teh levkocitov je ocenjen na 5-10% celotne mase. Glavna naloga povzročiteljev je uničenje elementov lastnega telesa, če so okuženi.

Limfociti se proizvajajo v kostnem mozgu. Iz krvi večina limfocitov preide v timus (timusno žlezo), kjer se spremenijo v T-limfocite, ki ščitijo človeško telo pred tujki. Ostali postanejo limfociti B, ki dokončajo svojo tvorbo v limfoidnem tkivu vranice, mandljev in bezgavk.

Limfociti B sintetizirajo protitelesa ob stiku s povzročitelji okužb. Obstaja še tretja vrsta limfocitov. To so tako imenovani naravni ubijalci. Zagotavljajo tudi zaščito telesa pred rakavimi celicami in virusi.

Norma limfocitov

Norma limfocitov: 1,2 - 3,0 tisoč / ml; 25-40 %. Stanje, pri katerem pride do povečanja števila limfocitov, se imenuje limfocitoza, ko se število zmanjša, pa limfopenija.

Kvantitativne spremembe so lahko tako absolutne (sprememba števila na enoto volumna krvi) kot relativne narave - sprememba odstotka drugih oblik levkocitov.

Pravila za analizo

Število limfocitov se določi s splošnim kliničnim testom krvi. Da bi bili rezultati zanesljivi, je pomembno upoštevati naslednja pravila:

1. Ženske se morajo testirati 4-5 dni po koncu menstruacije;
2. 2 dni pred testom omejite vnos slane, mastne hrane in izključite alkoholne pijače;
3. Čez dan se izogibajte fizičnemu in čustvenemu stresu;
4. Krvni test se vzame na prazen želodec;
5. Zbiranje se izvaja do 12. ure;
6. Vsaj 60 minut pred testom ne smete kaditi;
7. Na dan odvzema krvi prenehajte jemati zdravila;
8. Tik pred odvzemom krvi morate 10 minut sedeti v mirnem okolju.

Vzroki nizkih limfocitov pri odraslih

Zakaj je krvni test pokazal nizke limfocite in kaj to pomeni? Pri odraslih je raven limfocitov v krvi 20-40% vseh razpoložljivih levkocitov, vendar se lahko v nekaterih pogojih telesa standardni kazalnik bistveno spremeni. Številni razlogi povzročajo zmanjšanje teh celic, zato ni vedno enostavno postaviti diagnoze.

Do patoloških stanj, zaradi katerih Limfociti so lahko pri odraslih nizki, vključujejo:

• AIDS;
• kronične hepatološke lezije;
• aplastična;
• antišok podstopnja;
• septične, gnojne patologije;
• miliarni;
• hude nalezljive lezije;
• obsevanje in kemoterapija;
• uničenje limfocitov;
• dedne imunske patologije;
• odpoved ledvic;
• (razširjeno);
• limfogranulomatoza;
• splenomegalija;
• Itsenko-Cushingov sindrom;
• limfosarkom;
• zastrupitev s kortikosteroidi;
• akutne nalezljive in gnojno-vnetne bolezni: in abscesi.

Bolezni, ki jih spremlja limfopenija, so v večini primerov zelo nevarne in imajo slabo prognozo. Torej, če je oseba dolgo časa diagnosticirana z nizkimi limfociti, je to znak za takojšen in temeljit zdravniški pregled.

Limfopenije same ni mogoče popraviti; primarno bolezen je treba zdraviti. Pri kronični limfocitopeniji so včasih predpisane injekcije imunoglobulina. Če so nizki limfociti posledica prirojene imunske pomanjkljivosti, se opravi presaditev matičnih celic.

Zmanjšano število limfocitov v krvi otroka

Znižano raven limfocitov imenujemo limfocitopenija (ali limfopenija). Obstajata dve vrsti limfocitopenije: absolutna in relativna.

1. Absolutna limfopenija se pojavi, ko pride do imunske pomanjkljivosti (pridobljene ali prirojene). Lahko se pojavi pri bolnikih z levkemijo, levkocitozo, izpostavljenostjo ionizirajočemu sevanju in nevtrofilijo.
2. Za relativno limfopenijo Razvoj limfoidnega sistema je moten, nato pa limfociti zelo hitro umrejo. Pojavlja se tudi kot posledica kroničnih okužb in akutnih nalezljivih bolezni.

Limfopenija pri otroku ne kaže nobenih vidnih simptomov. Toda zaradi celične imunske pomanjkljivosti se pojavijo simptomi, kot so:

• znatno zmanjšanje bezgavk in tonzil;
• ekcem, pioderma (gnojne kožne lezije);
• alopecija (izpadanje las);
• splenomegalija (povečana vranica);
• zlatenica, bleda koža;
• petehije (hemoragične lise na koži).

Če so limfociti nizki v krvi, otrok pogosto doživi ponovitve nalezljivih bolezni, redke vrste mikroorganizmov pa pogosto delujejo kot patogeni.

Možni simptomi

Običajno je limfopenija asimptomatska, to je brez izrazitih znakov. Vendar pa možni simptomi nizke ravni limfocitov vključujejo naslednje:

1. Povečana vranica.
2. Splošna šibkost.
3. Gnojne lezije kože.
4. Pogosta utrujenost.
5. Bledica kože ali zlatenica.
6. Zmanjšanje bezgavk in tonzil.
7. Izguba las.
8. Pojav ekcemov in kožnih izpuščajev.
9. Pogosto je simptom nizkega števila limfocitov povišanje telesne temperature.

Če se pojavijo ti znaki, je priporočljivo opraviti teste, da preverite, ali jih spremlja limfopenija, ki lahko kaže na različne infekcijske in vnetne procese v človeškem telesu.

Kaj storiti, če so limfociti v krvi nizki

Za nizke limfocite ni posebnega zdravljenja, saj lahko simptom povzročijo številne resne patologije, pa tudi posamezne fizične značilnosti.

Če so odkriti in potrjeni laboratorijski rezultati nizke ravni limfocitov v krvi, pa tudi odsotnost jasnih simptomov vzroka njegovega nastanka, hematolog napoti bolnika na dodatno diagnostiko - ultrazvok, MRI / CT, radiografijo. , histologija, citologija itd.

Za odrasle in otroke je potek terapije predpisan izključno na podlagi ugotovljene diagnoze, ob upoštevanju posameznih značilnosti pacientovega telesa in njegove starosti.

Prva študija je vedno število levkocitov (glejte poglavje "Hematološke študije"). Ocenjuje se tako relativna kot absolutna vrednost števila perifernih krvnih celic.

Določanje glavnih populacij (T-celice, B-celice, naravne celice ubijalke) in subpopulacij T-limfocitov (T-pomočniki, T-CTL). Za začetno študijo imunskega statusa in ugotavljanje hudih motenj imunskega sistema WHO priporoča določitev razmerja CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, CD4/CD8. Študija vam omogoča, da določite relativno in absolutno število glavnih populacij limfocitov: celice T - CD3, celice B - CD19, celice naravne ubijalke (NK) - CD3- CD16++56+, subpopulacije limfocitov T (T helper celice CD3+ CD4+, T-citotoksični CD3+ CD8+ in njuno razmerje).

Raziskovalna metoda

Imunofenotipizacijo limfocitov izvajamo z uporabo monoklonskih protiteles proti površinskemu diferenciacijskemu tonzilitisu na celicah imunskega sistema s pomočjo pretočne laserske citofluorometrije na pretočnih citometrih.

Izbira območja analize limfocitov poteka na podlagi dodatnega markerja CD45, ki je prisoten na površini vseh levkocitov.

Pogoji za odvzem in shranjevanje vzorcev

Venska kri se vzame iz ulnarne vene zjutraj, strogo na prazen želodec, v vakuumski sistem do oznake, navedene na epruveti. K2EDTA se uporablja kot antikoagulant. Po zbiranju se epruveta za vzorec počasi obrne 8-10-krat, da se kri zmeša z antikoagulantom. Skladiščenje in prevoz strogo pri 18–23 ° C v pokončnem položaju največ 24 ur.

Neupoštevanje teh pogojev vodi do napačnih rezultatov.

Interpretacija rezultatov

Limfociti T (celice CD3+). Povečana količina kaže na hiperaktivnost imunskega sistema, opaženo pri akutni in kronični limfocitni levkemiji. Povečanje relativnega kazalnika se pojavi pri nekaterih virusnih in bakterijskih okužbah na začetku bolezni in pri poslabšanjih kroničnih bolezni.

Zmanjšanje absolutnega števila T-limfocitov kaže na odpoved celične imunosti, in sicer v delovanju celično-efektorske komponente imunosti. Ugotovimo ga pri vnetjih različnih etiologij, malignih novotvorbah, po poškodbah, operacijah, srčnem infarktu, kajenju in jemanju citostatikov. Povečanje njihovega števila v dinamiki bolezni je klinično ugoden znak.

Limfociti B (celice CD19+) Zmanjšanje opazimo pri fiziološki in prirojeni hipogamaglobulinemiji in agamaglobulinemiji, pri novotvorbah imunskega sistema, zdravljenju z imunosupresivi, akutnih virusnih in kroničnih bakterijskih okužbah ter stanju po odstranitvi vranice.

Limfociti NK s fenotipom CD3-CD16++56+ Naravne celice ubijalke (NK celice) so populacija velikih zrnatih limfocitov. Sposobne so lizirati tarčne celice, okužene z virusi in drugimi intracelularnimi antigeni, tumorske celice ter druge celice alogenskega in ksenogenskega izvora.

Povečanje števila NK celic je povezano z aktivacijo imunosti proti presaditvi, v nekaterih primerih opaženo pri bronhialni astmi, pojavi se pri virusnih boleznih, poveča se pri malignih novotvorbah in levkemiji ter v obdobju okrevanja.

T-limfociti pomočniki s fenotipom CD3+CD4+ Povečanje absolutnih in relativnih količin opazimo pri avtoimunskih boleznih, morda pri alergijskih reakcijah in pri nekaterih nalezljivih boleznih. To povečanje kaže na stimulacijo imunskega sistema na antigen in služi kot potrditev hiperreaktivnih sindromov.

Zmanjšanje absolutnega in relativnega števila celic T kaže na hiporeaktivni sindrom s kršitvijo regulativne komponente imunosti in je patognomski znak za okužbo s HIV; pojavlja se pri kroničnih boleznih (bronhitis, pljučnica itd.), solidnih tumorjih.

T-citotoksični limfociti s fenotipom CD3+ CD8+ Povečanje je zaznano pri skoraj vseh kroničnih okužbah, virusnih, bakterijskih, protozojskih okužbah. Značilen za okužbo s HIV. Zmanjšanje je opaziti pri virusnem hepatitisu, herpesu in avtoimunskih boleznih.

Razmerje CD4+/CD8+Študija razmerja CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) je priporočljiva samo za spremljanje okužbe s HIV in spremljanje učinkovitosti antiretrovirusne terapije. Omogoča določitev absolutnega in relativnega števila T-limfocitov, subpopulacij T-pomočnikov, CTL in njihovega razmerja.

Razpon vrednosti je 1,2–2,6. Zmanjšanje opazimo pri prirojenih imunskih pomanjkljivostih (DiGeorge, Nezelof, Wiskott-Aldrichov sindrom), pri virusnih in bakterijskih okužbah, kroničnih procesih, izpostavljenosti sevanju in strupenim kemikalijam, multiplem mielomu, stresu, zmanjšuje se s starostjo, pri endokrinih boleznih, solidnih tumorjih. Je patognomski znak za okužbo s HIV (manj kot 0,7).

Povečanje vrednosti nad 3 – pri avtoimunskih boleznih, akutni T-limfoblastni levkemiji, timomu, kronični T-levkemiji.

Sprememba razmerja je lahko povezana s številom pomočnikov in CTL pri določenem bolniku. Na primer, zmanjšanje števila celic CD4+ T pri akutni pljučnici na začetku bolezni povzroči zmanjšanje indeksa, vendar se CTL morda ne spremeni.

Za dodatne raziskave in ugotavljanje sprememb v imunskem sistemu pri patologijah zahteva oceno prisotnosti akutnega ali kroničnega vnetnega procesa in stopnje njegove aktivnosti, je priporočljivo vključiti štetje števila aktiviranih T-limfocitov s fenotipom CD3+HLA-DR+ in celic TNK s CD3+CD16. ++56+ fenotip.

T-aktivirani limfociti s fenotipom CD3+HLA-DR+ Označevalec pozne aktivacije, indikator imunske hiperreaktivnosti. Izraz tega označevalca je mogoče uporabiti za presojo resnosti in moči imunskega odziva. Pojavi se na T-limfocitih po 3. dnevu akutne bolezni. Z ugodnim potekom bolezni se zmanjša na normalno. Povečano izražanje limfocitov T se lahko pojavi pri številnih boleznih, povezanih s kroničnim vnetjem. Njegovo povečanje so opazili pri bolnikih s hepatitisom C, pljučnico, okužbo s HIV, solidnimi tumorji in avtoimunskimi boleznimi.

Limfociti TNK s fenotipom CD3+CD16++CD56+ T-limfociti, ki na svoji površini nosijo markerje CD16++ CD 56+. Te celice imajo lastnosti celic T in NK. Študija se priporoča kot dodaten marker za akutne in kronične bolezni.

Njihovo zmanjšanje v periferni krvi lahko opazimo pri različnih organsko specifičnih boleznih in sistemskih avtoimunskih procesih. Opažen je porast vnetnih bolezni različnih etiologij in tumorskih procesov.

Študija zgodnjih in poznih označevalcev aktivacije T-limfocitov (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) dodatno predpisan za oceno sprememb IS pri akutnih in kroničnih boleznih, za diagnozo, prognozo, spremljanje poteka bolezni in terapijo.

T-aktivirani limfociti s fenotipom CD3+CD25+, receptor IL2 CD25+ je marker zgodnje aktivacije. Funkcionalno stanje T-limfocitov (CD3+) je označeno s številom receptorjev, ki izražajo IL2 (CD25+). Pri hiperaktivnih sindromih se število teh celic poveča (akutna in kronična limfocitna levkemija, timom, zavrnitev presadka), poleg tega lahko njihovo povečanje kaže na zgodnjo fazo vnetnega procesa. V periferni krvi jih lahko odkrijemo v prvih treh dneh bolezni. Zmanjšanje števila teh celic lahko opazimo pri prirojenih imunskih pomanjkljivostih, avtoimunskih procesih, okužbi s HIV, glivičnimi in bakterijskimi okužbami, ionizirajočem sevanju, staranju in zastrupitvah s težkimi kovinami.

T-citotoksični limfociti s fenotipom CD8+CD38+ Prisotnost CD38+ na limfocitih CTL so opazili pri bolnikih z različnimi boleznimi. Informativni indikator za okužbo s HIV in opeklinsko bolezen. Povečanje števila CTL s fenotipom CD8+CD38+ opazimo pri kroničnih vnetnih procesih, raku in nekaterih endokrinih boleznih. Med terapijo se indikator zmanjša.

Subpopulacija naravnih celic ubijalk s fenotipom CD3-CD56+ Molekula CD56 je adhezijska molekula, ki je široko prisotna v živčnem tkivu. Poleg naravnih celic ubijalk se izraža na številnih vrstah celic, vključno s T-limfociti.

Povečanje tega kazalnika kaže na razširitev aktivnosti specifičnega klona celic ubijalk, ki imajo manjšo citolitično aktivnost kot NK celice s fenotipom CD3-CD16+. Število te populacije se poveča pri hematoloških tumorjih (NK-celični ali T-celični limfom, plazmacelični mielom, aplastični velikocelični limfom), kroničnih boleznih in nekaterih virusnih okužbah.

Zmanjšanje opazimo pri primarnih imunskih pomanjkljivostih, virusnih okužbah, sistemskih kroničnih boleznih, stresu, zdravljenju s citostatiki in kortikosteroidi.

CD95+ receptor– eden od receptorjev za apoptozo. Apoptoza je kompleksen biološki proces, potreben za odstranitev poškodovanih, starih in okuženih celic iz telesa. Receptor CD95 se izraža na vseh celicah imunskega sistema. Ima pomembno vlogo pri nadzoru delovanja imunskega sistema, saj je eden od receptorjev za apoptozo. Njegovo izražanje na celicah določa pripravljenost celic na apoptozo.

Zmanjšanje deleža limfocitov CD95+ v krvi bolnikov kaže na kršitev učinkovitosti zadnje faze izločanja okvarjenih in okuženih lastnih celic, kar lahko privede do ponovitve bolezni, kronizacije patološkega procesa, razvoja avtoimunskih bolezni in povečanje verjetnosti transformacije tumorja (na primer rak materničnega vratu s papilomatozno okužbo). Določanje izražanja CD95 ima prognostični pomen pri mielo- in limfoproliferativnih boleznih.

Povečanje intenzivnosti apoptoze opazimo pri virusnih boleznih, septičnih stanjih in uživanju drog.

Aktivirani limfociti CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Test odraža funkcionalno stanje T-limfocitov in se priporoča za spremljanje poteka bolezni in spremljanje imunoterapije pri vnetnih boleznih različnih etiologij.

HIV je virus, ki napada imunski sistem. Naš imunski sistem vsebuje veliko število celic, ki opravljajo različne funkcije:

• levkociti;
• fagociti;
• Makrofagi;
• nevtrofilci;
• celice T pomočnice (limfociti CD4);
• T-celice ubijalke.

Vsaka od teh celic je odgovorna za določeno stopnjo odziva na tujek. HIV prizadene le eno skupino celic – limfocite CD4 (limfocite T). Odgovorni so za prepoznavanje tujih genov.

Na podlagi števila določenih celic zdravnik sklepa o bolnikovem stanju. Test za AIDS temelji na številu limfocitov T (limfocitov CD4) v vzorcu krvi.

Bolezni, za katere lahko zdravnik predpiše test za aids

Če krvni test pokaže nejasne bolezni vezivnega tkiva ali vnetni proces, se lahko predpiše test na HIV. Dober pokazatelj HIV je močno zmanjšanje limfocitov CD4. V primerih, ko se odkrijejo druge okužbe in nagnjenost k določeni skupini bolezni (na primer prehladi), se test na HIV ne izvaja.

Pomembno! Če se odkrije vnetni proces, ki nima podlage, je treba opraviti test na HIV.

Naj vas ne skrbi, če bo vaš zdravnik začel govoriti o testiranju na HIV. Diagnoza morda ni potrjena. Če je rezultat pozitiven, je pomembno, da zdravljenje začnemo čim prej.

Norme

• Prekomerno delo telesa;
• Menstrualni ciklus;
• Epidemiološko okolje;
• Nekatera zdravila.

Število T-limfocitov (pomočnikov) se obnovi po počitku.

Če se absolutno število CD4 v določenem času ne povrne, vam lahko zdravnik naroči test na HIV.

Dekodiranje rezultata testa za aids

Pri zdravi osebi morajo biti vsi kazalniki normalni. Če se eden od parametrov spremeni, je predpisan test virusne obremenitve. Nato se rezultati krvnega testa primerjajo s tem indikatorjem. To vam bo pomagalo ugotoviti vzrok kršitve.

Število limfocitov se v primeru nalezljive bolezni zmanjša, po zdravljenju pa se povrne na normalno raven. Pri bolnikih s HIV ne bo izboljšanja delovanja sistema. Na tem temelji test.

Kaj je imunski status

Pri določanju imunskega statusa osebe se pregledajo krvni parametri:

• Skupno in relativno število limfocitov;
• Število T-limfocitov pomočnikov;
• Fagocitna aktivnost makrofagov;
• Spremembe imunoglobulinov različnih razredov.

Od vseh naštetih so le limfociti T specifični za HIV.

Pomembno! Zmanjšanje števila limfocitov CD4 kaže na hudo bolezen. Povečanje njihove ravni kaže na drug vnetni proces.

Kaj vam pove število CD4?

Celice CD4 se v določeni količini nahajajo v krvi. Če se zmanjšajo, telo hitro obnovi njihovo število. Ko je imunski sistem zatrt, se število limfocitov zmanjša, aktivnost T-supresorjev, nasprotno, vodi do aktivacije obrambe.

Virusne celice se razmnožujejo zelo hitro, zato se pri okužbi z virusom HIV raven celic T ne more vrniti na normalno raven.

Spremembe v številu CD4

Celice CD4 so prve, ki se odzovejo na prodor tujka v telo. Zmanjšanje ravni kaže na visoko aktivnost virusa.

Število celic/µl se lahko razlikuje glede na:

• Čas dneva (zjutraj je višji);
• Prisotnost nalezljivih bolezni;
• Postopek obdelave krvi (če je postopek nepravilen, se lahko celice uničijo);
• Sprejeta zdravila (hormonska in steroidna zdravila pomembno vplivajo na ta indikator).

odstotek CD4

Pri izvajanju testa na HIV je krvna slika pogosto izražena v odstotkih.

Pomožne celice CD3, D8, CD19, CD16+56 ter razmerje CD4–CD8 se zmanjšajo z zmanjšanjem imunskega statusa. Toda ti parametri ne kažejo na HIV.

Samo pomočnik CD4 je specifičen za virus imunske pomanjkljivosti:

• Če je njegova vsebnost 12-15%, je preračunano v krvi 200 celic/mm 3;
• Z vrednostmi od 29% je vsebnost celic od 450 celic / mm 3;

Za HIV negativno osebo je vrednost tega parametra 40 %.

Ko so imunske celice poškodovane, se imunost zmanjša. Za določitev hitrosti tega procesa se izračuna virusna obremenitev - količina tuje RNA na ml krvi. Ta parameter je prognostične narave.

Ženski imunski sistem je šibkejši, zato virusna obremenitev po rezultatih študije začne upadati veliko prej kot pri moških.

Kaj pomeni nezaznavno virusno breme?

Virusna obremenitev morda ni določena več mesecev. Odvisno od aktivnosti virusa se lahko njegovo število v krvi razlikuje. Potem, če je občutljivost naprave nizka, ne bo zaznala virusa.

Pomembno! Nedoločeno virusno breme ne pomeni, da je virus popolnoma izginil. Zdravljenja aidsa ni mogoče prekiniti, saj brez zdravljenja pride do remisije in poveča se količina virusa.

Vpliv cepljenja in okužbe

Cepljenje ali nalezljiva bolezen začasno poveča virusno breme. Jemanje preventivnih zdravil pa ga, nasprotno, zmanjša. Za natančno določitev imunskega statusa po navedenih postopkih morate počakati nekaj časa. Obdobje določi zdravnik glede na okoliščine.

Kakšne so prednosti nezaznavne virusne obremenitve?

HIV-pozitivne osebe imajo lahko nezaznavno virusno breme, če:

• Pravilno protiretrovirusno zdravljenje;
• Nizka stopnja napredovanja virusa.

To pomaga normalizirati bolnikovo stanje. S številnimi ponavljajočimi se tečaji se lahko razvije imunološka toleranca. Imunološki odziv se v tem primeru preneha odzivati ​​na zdravljenje. V tem primeru je treba spremeniti potek zdravljenja. To se lahko zgodi, če:

• Potek zdravljenja ni bil dokončan;
• Isti potek je bil ponovljen večkrat zapored;
• Individualna neobčutljivost na predpisana zdravila.

Naravne variacije

Virus je lahko v telesu v več fazah:

• Faza inkubacije;
• Obdobje akutne okužbe;
• Latentna stopnja;
• Stopnja sekundarnih bolezni;

V različnih obdobjih aktivnosti se kazalniki virusne obremenitve bistveno spreminjajo. V nekaj dneh se lahko ta parameter spremeni trikrat, ne glede na potek zdravljenja. Ostri kratkotrajni skoki morda ne bodo vplivali na bolnikovo zdravje. Določanje odpornosti na zdravila se izvaja večkrat. Končni rezultat se izračuna kot povprečje.

Jemanje supresorjev vodi do stabilizacije števila virusov v krvi.

Pomembne spremembe

Če število virusov HIV ostane visoko več mesecev, je vredno biti pozoren na to. Pomembni so kazalniki, ki presegajo normo za 3 do 5-krat. Če zvišanje števila CD4 med zdravljenjem izgine, boste morda morali zamenjati zdravila, ker je vaše telo nanje postalo desenzibilizirano.

Minimiziranje odstopanj

Pri analizi količine virusa imunske pomanjkljivosti in limfocitov CD4 v krvi je treba razumeti, da imajo različne naprave različno občutljivost. Lahko se razlikuje glede na znamko naprave ali vrednost kalibracije. Da bi zmanjšali napako, povezano z napravami, je treba analizo opraviti v isti kliniki z isto napravo.

Če je eden od partnerjev v družini HIV pozitiven, obstaja določen urnik v spolnem življenju. Če se virusna obremenitev poveča, se morate popolnoma vzdržati spolnih stikov, saj se verjetnost okužbe znatno poveča.

Ko se virusni prag zniža, z uporabo določenih zdravil po priporočilu zdravnika se lahko nadaljuje spolna aktivnost.

Kakšen je prag za določanje trenutnih testov

Občutljivi sodobni testi za diagnosticiranje HIV postopoma naraščajo. Večina naprav v Rusiji je občutljiva na število virusov 400-500 kosov/ml krvi. Nekatere dražje naprave zaznajo virus s standardno metodo pri številu 50 kosov/ml.

Literaturni podatki kažejo, da so nekateri sodobni modeli sposobni prepoznati HIV v številu le 2 kos/ml krvi, vendar se takšne tehnologije še ne uporabljajo v bolnišnicah in zasebnih klinikah.

Napake

Kljub visoki občutljivosti sodobnih naprav še vedno prihaja do napak pri določanju vrednosti virusne obremenitve. Povezani so z:

• Nepravilna kalibracija naprave;
• Slaba obdelava bučk po predhodnih analizah;
• Nepravilno pripravljen vzorec krvi;
• Prisotnost zdravil v krvi, ki zmanjšujejo občutljivost.

Te napake se popravijo s ponovnim testiranjem istega vzorca krvi ali novega dela.

Odločitev za začetek protiretrovirusnega zdravljenja

Če testi pokažejo visoko virusno obremenitev v daljšem časovnem obdobju, se zdravnik odloči za predpisovanje zdravljenja. Začetek zdravljenja okužbe s HIV in jemanje zdravil se ne začne takoj, ampak postopoma. Večina zdravil se vnese v potek zdravljenja v določenem obdobju, tako da se telo navadi na veliko število kemično agresivnih sestavin. Pri tej odločitvi ima pomembno vlogo število limfocitov CD4 v krvi.

Če oseba ne more ali ne želi začeti zdravljenja, mora nenehno opravljati teste in spremljati raven limfocitov v krvi.

Nasvet! Če še niste začeli s protiretrovirusnim zdravljenjem, se redno testirajte na HIV in krvno sliko CD4. Če zamudite kritični minimum, se telo morda ne bo spopadlo. Okrevanje bo zahtevalo veliko več časa, denarja in truda.

Če se vaša virusna obremenitev med zdravljenjem poveča

Če se vaše virusno breme po začetku zdravljenja še naprej povečuje, obstajata dve možnosti:

• Ni minilo dovolj časa zdravljenja za vzpostavitev normalnih vrednosti;
• Telo ni občutljivo na predpisana zdravila.

Odločitev o nadaljnjih ukrepih sprejme zdravnik na podlagi testov in bolnikovega stanja.

Kako izboljšati rezultate testa virusne obremenitve

Zaradi pravilnega zdravljenja naj bi se količina CD4 v krvi postopoma povrnila.

K temu bodo prispevali tudi:

• Pravilna prehrana;
• Zavračanje slabih navad;
• Brez stresa;
• Brez preobremenjenosti.

Če ne jemljete protiretrovirusnega zdravljenja

Ko se odločate, ali začeti zdravljenje ali ne, je pomembno razumeti, kaj je protiretrovirusno zdravljenje HIV/aidsa. Ta zdravila so namenjena zatiranju aktivnosti virusa zunaj telesnih celic. Zaradi tega se med terapijo obnovi imunski sistem bolnikov.

Kompleks zdravil vključuje tudi tiste, ki pomagajo obnoviti naravno obrambo telesa.

Če takšnega zdravljenja ni, se lahko virus neovirano razmnožuje in okuži vse več celic gostiteljevega imunskega sistema.

Glavna naloga T-limfocitov je prepoznavanje tujih ali spremenjenih lastnih antigenov kot del kompleksa z molekulami MHC. Če so na površini njegovih celic tuje ali spremenjene molekule, T-limfocit sproži njihovo uničenje.

Za razliko od limfocitov B, limfociti T ne proizvajajo topnih oblik molekul za prepoznavanje antigenov. Poleg tega večina limfocitov T ne more prepoznati in vezati topnih antigenov.

Da bi bil T-limfocit »pozoren na antigen«, morajo druge celice nekako »spustiti« antigen skozi sebe in ga prikazati na svoji membrani v kompleksu z MHC-I ali MHC-II. To je pojav predstavitve antigena limfocitu T. Prepoznavanje takega kompleksa s strani T-limfocitov je dvojno prepoznavanje ali MHC restrikcija T-limfocitov.

RECEPTOR T-LIMFOCITA ZA PREPOZNAVANJE ANTIGENA

Receptorji za prepoznavanje antigena celic T, TCR, so sestavljeni iz verig, ki pripadajo superdružini imunoglobulinov (glejte sliko 5-1). Področje prepoznavanja antigena TCR, ki štrli nad celično površino, je heterodimer, tj. sestoji iz dveh različnih polipeptidnih verig. Znani sta dve različici TCR, imenovani αβTCR in γδTCR. Te različice se razlikujejo po sestavi polipeptidnih verig regije za prepoznavanje antigena. Vsak limfocit T izraža samo eno različico receptorja. αβT celice so bile odkrite prej in podrobneje raziskane kot γδT limfociti. V zvezi s tem je bolj priročno opisati strukturo receptorja za prepoznavanje antigena limfocitov T na primeru αβTCR. Transmembransko locirani kompleks TCR je sestavljen iz 8 polipeptidov

riž. 6-1. Diagram T-celičnega receptorja in z njim povezanih molekul

verige (heterodimer α- in β-verig samega TCR, dve pomožni ζ verigi, kot tudi po en heterodimer ε/δ- in ε/γ-verig molekule CD3) (sl. 6- 1).

. Transmembranske verigeα in β TCR. To sta 2 polipeptidni verigi približno enake velikosti -α (molekulska masa 40-60 kDa, kisel glikoprotein) inβ (molekulska masa 40-50 kDa, nevtralen ali bazičen glikoprotein). Vsaka od teh verig vsebuje 2 glikozilirani domeni v zunajceličnem delu receptorja, hidrofobni (pozitivno nabit zaradi ostankov lizina in arginina) transmembranski del in kratko (5-12 aminokislinskih ostankov) citoplazemsko regijo. Zunajcelični deli obeh verig so povezani z enojno disulfidno vezjo.

- V-regija. Zunanje ekstracelularne (distalne) domene obeh verig imajo spremenljivo aminokislinsko sestavo. So homologni regiji V molekul imunoglobulina in sestavljajo regijo V TCR. To so regije V verig α in β, ki medsebojno delujejo s kompleksom MHC-peptid.

-C-območje. Proksimalne domene obeh verig so homologne konstantnim regijam imunoglobulinov; to so regije C TCR.

Kratka citoplazemska regija (tako α- kot β-veriga) ne more samostojno zagotoviti prevajanja signala v celico. V ta namen se uporablja 6 dodatnih polipeptidnih verig: γ, δ, 2ε in 2ζ.

.CD3 kompleks. Verigeγ, δ, ε med seboj tvorijo heterodimereγε in δε (skupaj jih imenujemo kompleks CD3). Ta kompleks je potreben za izražanjeα- in β-verige, njihovo stabilizacijo in prenos signala v celico. Ta kompleks je sestavljen iz zunajcelične, transmembranske (negativno nabite in zato elektrostatično povezane s transmembranskimi regijamiα- in β-verige) in citoplazemskih delov. Pomembno je, da ne zamenjujete verig kompleksa CD3 zγ δ verige dimera TCR.

.ζ - Verige med seboj povezani z disulfidnim mostom. Večina teh verig se nahaja v citoplazmi. ζ-verige prenašajo signal v celico.

.zaporedja ITAM. Citoplazemske regije polipeptidnih verigγ, δ, ε in ζ vsebuje 10 zaporedij ITAM (1 zaporedje v vsakemγ-, ε- in δ-verige in 3 - v vsaki ζ-verigi), ki sodelujejo s Fyn, citosolno tirozin kinazo, katere aktivacija sproži začetek biokemičnih reakcij za vodenje signala (glej sliko 6-1).

Vezava antigena vključuje ionske, vodikove, van der Waalsove in hidrofobne sile; konformacija receptorja se bistveno spremeni. Teoretično je vsak TCR sposoben vezati približno 10 5 različnih antigenov, ki niso samo sorodni po strukturi (navzkrižna reakcija), ampak tudi niso homologni po strukturi. Vendar pa je v resnici polispecifičnost TCR omejena na prepoznavanje le nekaj strukturno podobnih antigenskih peptidov. Strukturna osnova tega pojava je značilnost hkratnega prepoznavanja kompleksa MHC-peptid s strani TCR.

Koreceptorske molekule CD4 in CD8

Poleg samega TCR vsak zrel limfocit T izraža eno od tako imenovanih koreceptorskih molekul - CD4 ali CD8, ki prav tako interagirajo z molekulami MHC na APC ali tarčnih celicah. Vsak od njih ima povezano citoplazmatsko regijo

s tirozin kinazo Lck in verjetno prispeva k prenosu signala v celico med prepoznavanjem antigena.

.CD4(β2 domena) molekule MHC-II (spada v superdružino imunoglobulinov, glej sliko 5-1, b). CD4 ima molekulsko maso 55 kDa in 4 domene v zunajceličnem delu. Ko se T-limfocit aktivira, eno molekulo TCR »strežejo« 2 molekuli CD4: verjetno pride do dimerizacije molekul CD4.

.CD8 povezana z nespremenljivim delom(α3-domena) molekule MHC-I (spada v superdružino imunoglobulinov, glej sliko 5-1, a). CD8 - verižni heterodimerα in β, povezani z disulfidno vezjo. V nekaterih primerih najdemo homodimer dveh verig α, ki lahko interagira tudi z MHC-I. V zunajceličnem delu ima vsaka od verig eno imunoglobulinu podobno domeno.

T-celični receptorski geni

Geni α-, β-, γ- in δ-verige (slika 6-2, glej tudi sliko 5-4) so ​​homologne imunoglobulinskim genom in so med diferenciacijo T-limfocitov podvržene rekombinaciji DNA, kar teoretično zagotavlja nastanek približno 10 16 -10 18 variant receptorjev za vezavo antigenov (v resnici je ta raznolikost omejena s številom limfocitov v telesu na 10 9).

.Geni α-verige imajo ~54 V-segmentov, 61 J-segmentov in 1 C-segment.

.Geni β-verige vsebujejo ~65 V-segmentov, 2 D-segmenta, 13 J-segmentov in 2 C-segmenta.

.δ-verižni geni. Med V- in J-segmentoma α-verige so geni D-(3), J-(4) in C-(1) segmentov δ-verigeγ δTCR. Segmenti V verige δ so razporejeni med segmenti V verige α.

.γ-verižni geni γ δTCR imajo 2 C segmenta, 3 J segmente pred prvim C segmentom in 2 J segmenta pred drugim C segmentom, 15 V segmentov.

Preureditev genov

.Do rekombinacije DNA pride, ko se V-, D- in J-segmenti združijo in jo katalizira isti kompleks rekombinaze kot med diferenciacijo limfocitov B.

.Po preureditvi VJ v genih α-verige in VDJ v genih β-verige, kot tudi po dodatku nekodirajočih N- in P-nukleotidov v DNK

riž. 6-2. Geni α- in β-verig receptorja za prepoznavanje antigena človeških T-limfocitov

prepisana z RNA. Zlitje s segmentom C in odstranitev odvečnih (neuporabljenih) segmentov J se pojavi med spajanjem primarnega transkripta.

.Gene α-verige je mogoče večkrat preurediti, medtem ko so geni β-verige že pravilno preurejeni in izraženi. Zato obstaja nekaj možnosti, da lahko posamezna celica nosi več kot eno različico TCR.

.Geni TCR niso podvrženi somatski hipermutagenezi.

PREVAJANJE SIGNALOV IZ RECEPTORJEV ZA PREPOZNAVANJE ANTIGENA LIMFOCITOV

TCR in BCR imata številne skupne vzorce registracije in prenosa aktivacijskih signalov v celico (glej sliko 5-11).

. Grozdenje receptorjev. Za aktivacijo limfocita je potrebno združevanje receptorjev za prepoznavanje antigena in koreceptorjev, tj. »navzkrižno povezovanje« več receptorjev z enim antigenom.

. Tirozin kinaze. Pri prenosu signala imajo pomembno vlogo procesi fosforilacije/defosforilacije proteinov na tirozinskem ostanku pod delovanjem tirozin kinaz in tirozin fosfataz.

vodi do aktivacije ali inaktivacije teh proteinov. Ti procesi so lahko reverzibilni in "priročni" za hitre in prilagodljive celične reakcije na zunanje signale.

. Src kinaze. S tirozinom bogate ITAM sekvence citoplazemskih regij imunoreceptorjev so fosforilirane z nereceptorskimi (citoplazemskimi) tirozin kinazami družine Src (Fyn, Blk, Lyn v limfocitih B, Lck in Fyn v limfocitih T).

. ZAP-70 kinaze(v limfocitih T) oz Syk(v B-limfocitih), ki se vežejo na fosforilirana zaporedja ITAM, se aktivirajo adapterski proteini in začnejo fosforilirati: LAT (Povezovalnik za aktivacijo celic T)(ZAP-70 kinaza), SLP-76 (ZAP-70 kinaza) ali SLP-65 (Syk kinaza).

. Rekrutirajo se adapterski proteini fosfoinozitid 3-kinaza(PI3K). Ta kinaza nato aktivira serin/treonin protein kinazo Akt, kar povzroči povečano biosintezo beljakovin, kar spodbuja pospešeno rast celic.

. Fosfolipaza Cγ (glej sliko 4-8). Kinaze družine Tec (Btk - v B-limfocitih, Itk - v T-limfocitih) vežejo adapterske proteine ​​in aktivirajo fosfolipazo Cγ (PLCγ). ).

PLCγ cepi fosfatidilinozitol difosfat (PIP 2) celične membrane v inozitol 1,4,5-trifosfat (IP 3) in diacilglicerol

(DAG).

DAG ostane v membrani in aktivira protein kinazo C (PKC), serin/treonin kinazo, ki aktivira evolucijsko "starodavni" transkripcijski faktor NFκB.

IP 3 se veže na svoj receptor v endoplazmatskem retikulumu in sprošča kalcijeve ione iz zalog v citosol.

Prosti kalcij aktivira proteine, ki vežejo kalcij - kalmodulin, ki uravnava aktivnost številnih drugih proteinov, in kalcinevrin, ki defosforilira in s tem aktivira jedrski faktor aktiviranih T-limfocitov NFAT. (Jedrski faktor aktiviranih celic T).

. Ras in drugi majhni G proteini v neaktivnem stanju so povezani z BDP, vendar adapterski proteini slednje nadomestijo z GTP, s čimer prenesejo Ras v aktivno stanje.

Ras ima lastno GTPazno aktivnost in hitro odcepi tretji fosfat ter se tako vrne v neaktivno stanje (samoinaktivacija).

V stanju kratkotrajne aktivacije Ras uspe aktivirati naslednjo kaskado kinaz, imenovano MAPK (mitogenom aktivirana protein kinaza), ki v končni fazi aktivirajo transkripcijski faktor AP-1 v celičnem jedru. Na sl. Slika 6-3 prikazuje shematski prikaz glavnih signalnih poti TCR. Aktivacijski signal se vklopi, ko se TCR veže na ligand (MHC peptidni kompleks) s sodelovanjem koreceptorja (CD4 ali CD8) in kostimulatorne molekule CD28. To vodi do aktivacije kinaz Fyn in Lck. Regije ITAM v citoplazemskih delih polipeptidnih verig CD3 so označene rdeče. Odraža se vloga Src kinaz, povezanih z receptorjem, pri fosforilaciji proteinov: tako receptorskih kot signalnih. Omembe vreden je izjemno širok spekter učinkov Lck kinaze, povezane s koreceptorjem; vloga Fyn kinaze je manj gotova (kar se odraža v diskontinuirani naravi linij).

riž. 6-3. Viri in smer proženja aktivacijskih signalov pri stimulaciji T-limfocitov. Oznake: ZAP-70 (ζ - povezana protein kinaza, pravijo masa 70 kDa) - protein kinaza p70, povezana z ζ-verigo; PLCγ (fosfolipaza Cγ ) - fosfolipaza C, izoforma γ; PI3K (fosfatidil inozitol 3-kinaza)- fosfatidilinozitol 3-kinaza; Lck, Fyn-tirozin kinaze; LAT, Grb, SLP, GADD, Vav - adapterski proteini

Tirozin kinaza ZAP-70 ima ključno vlogo pri posredovanju med receptorskimi kinazami ter adapterskimi molekulami in encimi. Aktivira (preko fosforilacije) adapterski molekuli SLP-76 in LAT, slednja pa posreduje aktivacijski signal drugim adapterskim proteinom GADD, GRB in aktivira y-izoformo fosfolipaze C (PLCy). Pred to stopnjo transdukcija signala vključuje izključno dejavnike, povezane s celično membrano. K aktivaciji signalnih poti pomembno prispeva kostimulatorna molekula CD28, ki svoje delovanje uresničuje preko povezane lipidne kinaze PI3K. (fosfatidil inozitol 3-kinaza). Glavna tarča PI3K kinaze je faktor Vav, povezan s citoskeletom.

Kot posledica tvorbe signala in njegovega prenosa od T-celičnega receptorja do jedra nastanejo 3 transkripcijski faktorji - NFAT, AP-1 in NF-kB, ki inducirajo izražanje genov, ki nadzorujejo proces aktivacije. T-limfocitov (slika 6-4). Nastanek NFAT povzroči signalna pot, ki ni odvisna od kostimulacije, ki se aktivira zaradi aktivacije fosfolipaze C in se realizira s sodelovanjem ionov.

riž. 6-4. Shema signalnih poti med aktivacijo T celic. NFAT (jedrski faktor aktiviranih celic T), AP-1 (aktivacijski protein-1), NF-κB (jedrski dejavnikZa -gen celic B)- transkripcijski faktorji

Ca 2+. Ta pot povzroči aktivacijo kalcineurina, ki s fosfatazno aktivnostjo defosforilira citosolni faktor NFAT-P. Zahvaljujoč temu pridobi NFAT-P sposobnost migriranja v jedro in se veže na promotorje aktivacijskih genov. Faktor AP-1 nastane kot heterodimer proteinov c-Fos in c-Jun, katerih tvorba je inducirana zaradi aktivacije ustreznih genov pod vplivom dejavnikov, ki nastanejo kot posledica izvajanja treh komponente kaskade MAP. Te poti aktivirata kratka GTP-vezavna proteina Ras in Rac. K izvajanju kaskade MAP pomembno prispevajo signali, odvisni od kostimulacije preko molekule CD28. Tretji transkripcijski faktor, NF-kB, je znan kot glavni transkripcijski faktor prirojenih imunskih celic. Aktivira se s cepitvijo blokirne podenote IκB s kinazo IKK, ki se v celicah T aktivira s signalizacijo, odvisno od izoforme protein kinaze C (PKC9). K aktivaciji te signalne poti največ prispevajo kostimulatorni signali iz CD28. Nastali transkripcijski faktorji se vežejo na promotorske regije genov in inducirajo njihovo izražanje. Izražanje genov je še posebej pomembno za začetne faze odziva celic T na stimulacijo IL2 in IL2R, ki določa produkcijo T-celičnega rastnega faktorja IL-2 in izražanje njegovega visokoafinitetnega receptorja na T-limfocitih. Posledično IL-2 deluje kot avtokrini rastni faktor, ki povzroča proliferativno širjenje klonov T-celic, ki sodelujejo pri odzivu na antigen.

DIFERENCIACIJA T-LIMFOCITA

Osnova za identifikacijo stopenj razvoja T-limfocitov je stanje genov receptorja V in izražanja TCR ter koreceptorjev in drugih membranskih molekul. Shema diferenciacije T-limfocitov (slika 6-5) je podobna zgornji shemi za razvoj B-limfocitov (glej sliko 5-13). Predstavljene so ključne značilnosti fenotipa in rastnih faktorjev razvijajočih se celic T. Sprejete oznake za stopnje razvoja T-celic so določene z izražanjem koreceptorjev: DN (od Dvojno negativno CD4CD8) - dvojni negativ, DP (iz dvojno pozitivno, CD4 + CD8 +) - dvojno pozitivno, SP (od enojno pozitivno, CD4 + CD8 - in CD4CD8 +) so enkratni pozitivni. Delitev DNtimocitov na stopnje DN1, DN2, DN3 in DN4 temelji na naravi

riž. 6-5. Razvoj limfocitov T

izražanje molekul CD44 in CD25. Drugi simboli: SCF (iz faktor izvornih celic)- faktor izvornih celic, lo (low; index mark) - nizka stopnja izražanja. Stopnje preureditve: D-J - predhodna stopnja, povezava segmentov D in J (samo v genih β- in δ-verig TCR, glej sliko 6-2), V-DJ - končna faza, povezava zarodnega gena V s kombiniranim segmentom DJ .

.Timociti se razlikujejo od običajne prekurzorske celice, ki, medtem ko je še zunaj timusa, izraža membranske markerje, kot so CD7, CD2, CD34 in citoplazmatsko obliko CD3.

.Prekurzorske celice, zavezane k diferenciaciji v limfocite T, migrirajo iz kostnega mozga v subkapsularno cono skorje timusa, kjer se počasi razmnožujejo v približno enem tednu. Na timocitih se pojavijo nove membranske molekule CD44 in CD25.

.Nato se celice premaknejo globlje v skorjo timusa in molekule CD44 in CD25 izginejo iz njihove membrane. Na tej stopnji se začne preureditev genov β-, γ- in TCR δ verige. Če geniγ- in δ-verige imajo čas, da so produktivne, tj. brez premika okvirja, prerazporedi prej kot geni β-verige, nato se limfocit diferencira naprej kotγ δT. V nasprotnem primeru se β-veriga izraža na membrani v kompleksu s pTα (invariantna nadomestna veriga, ki na tej stopnji nadomesti pravo verigo α) in CD3. To služi

signal za zaustavitev preureditve genov γ- in δ-verige. Celice se začnejo razmnoževati in izražajo CD4 in CD8 - dvojno pozitivno timociti. V tem primeru se kopiči masa celic s pripravljeno β-verigo, vendar s še ne preurejenimi α-verižnimi geni, kar prispeva k raznolikosti αβ-heterodimerov.

.Na naslednji stopnji se celice prenehajo deliti in začnejo preurejati gene Vα, večkrat v 3-4 dneh. Preureditev genov α-verige povzroči ireverzibilno delecijo δ-lokusa, ki se nahaja med segmenti genov α-verige.

.Do izražanja TCR pride z vsako novo varianto α-verige in selekcijo (selekcijo) timocitov glede na moč vezave na MHC-peptidni kompleks na membranah epitelijskih celic timusa.

Pozitivna selekcija: odmrejo timociti, ki niso vezali nobenega od razpoložljivih kompleksov MHC-peptid. Zaradi pozitivne selekcije približno 90% timocitov umre v timusu.

Negativna selekcija eliminira timocitne klone, ki vežejo MHC-peptidne komplekse s previsoko afiniteto. Negativna selekcija izloči od 10 do 70 % celic, ki so bile podvržene pozitivni selekciji.

Timociti, ki so vezali katerega od kompleksov MHC-peptid s pravilnim, tj. s povprečno močjo in afiniteto prejmejo signal za preživetje in nadaljujejo diferenciacijo.

.Za kratek čas obe molekuli koreceptorja izgineta iz membrane timocita, nato pa se izrazi ena od njiju: timociti, ki prepoznajo peptid v kompleksu z MHC-I, izražajo koreceptor CD8, z MHC-II pa koreceptor CD4. V skladu s tem dve vrsti T-limfocitov dosežeta periferijo (v razmerju približno 2:1): CD8 + in CD4 +, katerih funkcije v prihajajočih imunskih odzivih so različne.

-CD8+ T celice igrajo vlogo citotoksičnih T-limfocitov (CTL) - prepoznajo in neposredno ubijejo celice, spremenjene z virusom, tumorjem in drugimi "spremenjenimi" celicami (slika 6-6).

-CD4+ T celice. Funkcionalna specializacija limfocitov CD4 + T je bolj raznolika. Pomemben del CD4 + T-limfocitov med razvojem imunskega odziva postanejo T-pomočniki (pomočniki), ki medsebojno delujejo z B-limfociti, T-limfociti in drugimi celicami med

riž. 6-6. Mehanizem delovanja citotoksičnega T-limfocita na tarčno celico. V celici T ubijalki se kot odgovor na povečanje koncentracije Ca 2+ zrnca s perforinom (vijolični ovali) in granzimi (rumeni krogi) spojijo s celično membrano. Sproščeni perforin se vgradi v membrano tarčne celice s poznejšo tvorbo por, prepustnih za granzime, vodo in ione. Posledično se ciljna celica lizira

neposrednim stikom ali preko topnih faktorjev (citokinov). V določenih primerih se lahko razvijejo v CD4 + CTL: zlasti takšne limfocite T najdemo v znatnih količinah v koži bolnikov z Lyellovim sindromom.

T helper subpopulacije

Od poznih 80. let 20. stoletja je bilo običajno razlikovati 2 subpopulaciji T-pomočnikov (odvisno od tega, kateri niz citokinov proizvajajo) - Th1 in Th2. V zadnjih letih se je spekter podskupin celic CD4 + T še naprej širil. Odkrite so bile subpopulacije, kot so Th17, T-regulatorji, Tr1, Th3, Tfh itd.

Glavne podskupine celic T CD4+:

. Th0 - Limfociti CD4+ T v zgodnjih fazah razvoja imunskega odziva proizvajajo le IL-2 (mitogen za vse limfocite).

.Th1- diferencirana subpopulacija CD4 + T-limfocitov, specializirana za proizvodnjo IFNγ, TNF β in IL-2. Ta subpopulacija uravnava številne celične imunske odzive, vključno z zapoznelo preobčutljivostjo (DTH) in aktivacijo CTL. Poleg tega Th1 stimulira proizvodnjo opsonizirajočih protiteles IgG s strani limfocitov B, ki sprožijo kaskado aktivacije komplementa. Razvoj čezmernega vnetja s kasnejšo poškodbo tkiva je neposredno povezan z aktivnostjo subpopulacije Th1.

.Th2- diferencirana subpopulacija limfocitov CD4 + T, specializirana za proizvodnjo IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 in IL-13. Ta subpopulacija je vključena v aktivacijo limfocitov B in spodbuja njihovo izločanje velikih količin protiteles različnih razredov, zlasti IgE. Poleg tega je subpopulacija Th2 vpletena v aktivacijo eozinofilcev in razvoj alergijskih reakcij.

.Th17- subpopulacija limfocitov CD4 + T, specializirana za proizvodnjo IL-17. Te celice zagotavljajo protiglivično in protimikrobno zaščito epitelijskih in mukoznih barier ter igrajo ključno vlogo pri patologiji avtoimunskih bolezni.

.T-regulatorji- limfociti CD4 + T, ki zavirajo aktivnost drugih celic imunskega sistema z izločanjem imunosupresivnih citokinov - IL-10 (zaviralec aktivnosti makrofagov in Th1 celic) in TGFβ - zaviralec proliferacije limfocitov. Zaviralni učinek je mogoče doseči tudi z neposredno medcelično interakcijo, saj se na membrani nekaterih T-regulatorjev izražajo induktorji apoptoze aktiviranih in "izrabljenih" limfocitov - FasL (Fas ligand). Obstaja več populacij regulativnih limfocitov T CD4 +: naravne (Treg), ki dozorijo v timusu (CD4 + CD25 +, izražajo transkripcijski faktor Foxp3), in inducirane - lokalizirane pretežno v sluznicah prebavnega trakta in prehajajo v nastanek TGFβ (Th3) ali IL-10 (Tr1). Normalno delovanje T-regulatorjev je potrebno za vzdrževanje homeostaze imunskega sistema in preprečevanje razvoja avtoimunskih bolezni.

.Dodatne pomožne populacije. Pred kratkim so opisali vedno nove populacije limfocitov CD4 + T, klasično

razvrščeni glede na vrsto citokina, ki ga pretežno proizvajajo. Torej, kot se je izkazalo, je ena najpomembnejših populacij Tfh (iz angleščine. folikularni pomočnik- folikularni pomočnik). Ta populacija limfocitov CD4 + T se pretežno nahaja v limfoidnih foliklih in deluje kot pomočnik limfocitom B s proizvodnjo IL-21, kar povzroči njihovo zorenje in končno diferenciacijo v plazemske celice. Poleg IL-21 lahko Tfh proizvaja tudi IL-6 in IL-10, ki sta potrebna za diferenciacijo limfocitov B. Motnje v delovanju te populacije vodijo v razvoj avtoimunskih bolezni ali imunskih pomanjkljivosti. Druga "novo nastajajoča" populacija so proizvajalci Th9 - IL-9. Očitno so to Th2, ki so prešli na izločanje IL-9, ki lahko povzroči proliferacijo celic T pomočnic v odsotnosti antigenske stimulacije, pa tudi poveča izločanje IgM, IgG in IgE s strani limfocitov B.

Glavne subpopulacije celic T pomočnic so predstavljene na sl. 6-7. Slika povzema trenutno razumevanje prilagodljivih subpopulacij celic CD4 + T, tj. nastajanje subpopulacij-

riž. 6-7. Prilagodljive podskupine CD4+ celic T (citokini, diferenciacijski faktorji, kemokinski receptorji)

se pojavi med imunskim odzivom in ne med naravnim razvojem celic. Za vse vrste celic T pomočnic so navedeni citokini induktorji (na puščicah, ki vodijo do krogov, ki simbolizirajo celice), transkripcijski faktorji (znotraj krogov), receptorji za kemokine, ki usmerjajo migracijo (v bližini črt, ki segajo od "celične površine"), in proizvedeni citokini (v pravokotnikih, na katere so usmerjene puščice, ki segajo iz krogov).

Razširitev družine adaptivnih subpopulacij celic CD4 + T je zahtevala rešitev vprašanja narave celic, s katerimi te subpopulacije interagirajo (komu nudijo »pomoč« v skladu s svojo funkcijo pomočnika). Te ideje se odražajo na sl. 6-8. Ponuja tudi posodobljen pogled na funkcije teh subpopulacij (sodelovanje pri zaščiti pred določenimi skupinami patogenov) ter patološke posledice neuravnoteženega povečanja aktivnosti teh celic.

riž. 6-8. Prilagodljive podskupine celic T (partnerske celice, fiziološki in patološki učinki)

γ δT limfociti

Velika večina (99 %) limfocitov T, ki so podvrženi limfopoezi v timusu, so celice αβT; manj kot 1 % je celic γδT. Slednji se večinoma diferencirajo izven timusa, predvsem v sluznicah prebavnega trakta. V koži, pljučih, prebavnem in reproduktivnem traktu so prevladujoča subpopulacija intraepitelnih limfocitov. Med vsemi limfociti T v telesu predstavljajo celice γδT od 10 do 50 %. V embriogenezi se celice γδT pojavijo prej kot celice αβT.

.γδ T celice ne izražajo CD4. Molekula CD8 se izraža na nekaterih celicah γδT, vendar ne kot ap-heterodimer, kot na celicah CD8 + apT, temveč kot homodimer dveh a-verig.

.Lastnosti prepoznavanja antigenov:γδTCR bolj kot αβTCR spominjajo na imunoglobuline, tj. sposobne vezave nativnih antigenov neodvisno od klasičnih MHC molekul - za celice γδT predhodna obdelava antigena z APC ni potrebna ali sploh ni potrebna.

.Raznolikostγδ TCR manj kot αβTCR ali imunoglobulini, čeprav so na splošno celice γδT sposobne prepoznati širok spekter antigenov (predvsem fosfolipidne antigene mikobakterij, ogljikove hidrate, proteine ​​toplotnega šoka).

.Funkcijeγδ T celiceše niso povsem raziskani, čeprav prevladuje mnenje, da služijo kot ena od povezovalnih komponent med prirojeno in pridobljeno imunostjo. Celice γδT so ena prvih ovir za patogene. Poleg tega imajo te celice, ki izločajo citokine, pomembno imunoregulacijsko vlogo in se lahko diferencirajo v CTL.

NKT limfociti

T celice naravne ubijalke (NKT celice) predstavljajo posebno subpopulacijo limfocitov, ki zasedajo vmesno mesto med prirojenimi in adaptivnimi imunskimi celicami. Te celice imajo lastnosti limfocitov NK in T. Celice NKT izražajo αβTCR in za celice NK specifične receptorje NK1.1, ki spadajo v superdružino lektinskih glikoproteinov tipa C. Vendar ima receptor TCR celic NKT pomembne razlike od receptorja TCR običajnih celic. Pri miših večina celic NKT izraža invariantno domeno V verige a, ki jo sestavljajo

segmenti Vα14-Jα18, včasih imenovani tudi Jα281. Pri ljudeh je domena V verige α sestavljena iz segmentov Vα24-JαQ. Pri miših je veriga α invariantnega TCR pretežno kompleksirana z Vβ8.2, pri ljudeh pa z Vβ11. Zaradi strukturnih značilnosti verig TCR se celice NKT imenujejo invariantne - iTCR. Razvoj NKT celic je odvisen od molekule CD1d, ki je podobna molekulam MHC-I. Za razliko od klasičnih molekul MHC-I, ki predstavljajo peptide celicam T, CD1d celicam T predstavlja samo glikolipide. Čeprav se domneva, da so jetra mesto razvoja NKT celic, obstajajo trdni dokazi o vlogi timusa pri njihovem razvoju. NKT celice imajo pomembno vlogo pri uravnavanju imunosti. Pri miših in ljudeh z različnimi avtoimunskimi procesi je funkcionalna aktivnost NKT celic močno okrnjena. Popolne slike o pomenu tovrstnih motenj v patogenezi avtoimunskih procesov ni. V nekaterih avtoimunskih procesih lahko NKT celice igrajo supresorsko vlogo.

Poleg nadzora avtoimunskih in alergijskih reakcij NKT celice sodelujejo pri imunskem nadzoru in povzročajo zavrnitev tumorja, ko se njihova funkcionalna aktivnost poveča. Njihova vloga pri protimikrobni zaščiti je velika, zlasti v zgodnjih fazah razvoja infekcijskega procesa. Celice NKT sodelujejo pri različnih vnetnih infekcijskih procesih, zlasti pri virusnih lezijah jeter. Na splošno so NKT celice multifunkcionalna populacija limfocitov, ki še vedno nosijo veliko znanstvenih skrivnosti.

Na sl. 6-9 povzema podatke o diferenciaciji limfocitov T v funkcionalne subpopulacije. Predstavljenih je več nivojev bifurkacije: γ δT/ αβT, nato za celice αβT - NKT/ drugi limfociti T, za slednje - CD4 + /CD8 +, za celice CD4 + T - Th/Treg, za limfocite CD8 + T - CD8αβ /CD8αα. Prikazani so tudi diferenciacijski transkripcijski faktorji, odgovorni za vse razvojne linije.

riž. 6-9. Naravne subpopulacije T-limfocitov in njihovi diferenciacijski dejavniki

domov » Zabavna zabava » Cd3 cd8 t citotoksičen. Kaj so limfociti v krvnem testu, normalni in nenormalni