Značilno število kodrov za povzročitelje sifilisa. Treponema pallidum - povzročitelj sifilisa

Sifilis je ciklična človeška spolna bolezen, ki jo povzroča bleda spiroheta; Stopnja I se kaže s šankroidom (fr. šankr– razjeda), stopnja II – poškodbe sten krvnih žil in razni izpuščaji, stopnja III – dlesni v različnih organih s poškodbo živčnega sistema. Guma (lat. . gumi- guma) je kronični infiltrat v obliki vozla, nagnjen k razpadu in razjedam. Sifilitična guma ( sin.: sifilični granulom, gumma syphilide, terciarni sifilom) je neboleča hemisferična guma, ki je manifestacija terciarnega aktivnega sifilisa. Patogen – Treponema pallidum- sta ga leta 1905 odkrila F. Schaudin in E. Hoffmann.

T. pallidum– mikroorganizem spiralne oblike, dimenzij 0,09 – 0,18 x 6 – 20 mikronov. Število spiralnih zavojev je od 8 do 12, zavoji so enakomerni, nahajajo se na enaki razdalji drug od drugega, približno 1 mikron, višina se zmanjšuje proti koncem. Pod elektronskim mikroskopom je videti kot kača ali deževnik. Na obeh koncih treponeme so pritrjeni blefaroplasti, katerih število se spreminja od dveh do več, tvorijo osno nit, zvito okoli protoplazemskega cilindra spirohete. V neugodnih pogojih lahko tvori ciste. V telesu živali se lahko pojavi kapsuli podoben primer mukopolisaharidne narave.

Treponema se z anilinskimi barvili slabo obarva, zato se povzročitelj sifilisa imenuje bleda spiroheta. Reducira srebrov nitrat v kovinsko srebro, ki se odlaga na površino mikroba in ga naredi vidnega v tkivih: pri barvanju po Morozovu so treponeme videti rjave ali skoraj črne. Pri barvanju po Romanovsky-Giemsi pridobijo bledo rožnato barvo.

Treponeme se običajno razmnožujejo s prečno delitvijo, razdeljene celice pa se lahko nekaj časa držijo druga druge. Čas delitve je približno 30 ur.

Živi treponemi so zelo mobilni, izvajajo gibe okoli lastne vzdolžne osi, pa tudi upogibne, valovite in translacijske gibe.

Do danes ni metode, s katero bi bilo mogoče stabilno pridobivati ​​kulture treponem. Za človeka patogena treponema pallidum ni bila nikoli gojena v umetnih hranilnih medijih, v piščančjih zarodkih ali celičnih kulturah. Tiste sorte njihovih sevov, ki rastejo v anaerobnih pogojih, so verjetno saprofitne spirohete, ki so blizu povzročitelju sifilisa. Njihova fiziologija ostaja malo raziskana. Treponeme so kemoorganotrofi, nimajo katalaze in oksidaze in lahko fermentirajo ogljikove hidrate. Rastejo na zelo bogatem mediju, ki vsebuje do 11 aminokislin, vitamine, soli in serumski albumin. Najboljši način za gojenje patogenih spirohet je okužba zajca v testisu (eksperimentalni orhitis). Predlagano je bilo, da obstaja T. pallidumživljenjski cikel, ki vključuje poleg spiralne oblike tudi zrnato stopnjo in stopnjo cistastih sferičnih teles. Zrnate oblike teh mikroorganizmov lahko prehajajo skozi bakterijske filtre.

Antigeni treponeme so slabo raziskani. Ugotovljeno je bilo, da treponemi vsebujejo proteinske, polisaharidne in lipidne komplekse. Antigenska sestava kulturnih in tkivnih treponem je tako blizu, da lahko antigene, pripravljene iz kulturnih treponem, uporabimo za RSC pri diagnozi sifilisa. V človeškem telesu treponemi spodbujajo nastajanje protiteles, ki povzročajo imobilizacijo in smrt živih gibljivih treponem, fiksirajo komplement v prisotnosti suspenzije. T. pallidum ali sorodnih spirohet, odkrijejo pa jih tudi pri posrednem RIF.

Povzročitelj sifilisa ne proizvaja eksotoksinov. Treponema pallidum je razmeroma neodporna na zunanje vplive. Pri sušenju in pri povišanih temperaturah (pri 55 °C 15 minut) hitro odmrejo. V 0,3 – 0,5 % raztopini HCl takoj izgubijo gibljivost; Prav tako ga hitro izgubijo in umrejo v prisotnosti arzena, bizmuta in živega srebra. V polni krvi ali serumu pri 4 °C ostanejo sposobni preživeti 24 ur, kar je treba upoštevati pri transfuziji krvi.

Epidemiologija. Sifilis je tipična spolno prenosljiva bolezen. Vir okužbe je bolna oseba, običajno kužna 3 do 5 let; bolniki s poznimi oblikami sifilisa niso kužni. Okužba se v veliki večini primerov pojavi z različnimi vrstami spolnih in gospodinjskih stikov, redkeje transplacentalno od bolne matere do otroka (prirojeni sifilis) ali kot poklicna okužba s stikom med zdravstvenim osebjem. V naravnih razmerah za sifilisom zbolijo le ljudje, v poskusih se lahko okužijo opice, hrčki in zajci. Pri opicah se šankroid razvije na mestu vboda treponeme, pri kuncih in hrčkih pa je okužba asimptomatska.

Patogeneza in klinika. Inkubacijska doba za pridobljeni sifilis se giblje od 2 do 10 tednov, običajno 20 – 28 dni. Vstopna mesta okužbe so najpogosteje sluznice spolnih organov, redkeje ustne votline, pa tudi poškodovana koža. Na mestu prodiranja se patogen razmnožuje in nastane primarni sifilom (trdi šankr) - erozija ali razjeda s stisnjeno bazo. Nato povzročitelj vstopi v limfni sistem in razvijeta se limfangitis in regionalni limfadenitis. To je značilna klinična slika primarnega sifilisa, ki traja 1,5-2 meseca. Potem ti znaki izginejo. Sekundarno obdobje sifilisa je povezano s posploševanjem procesa, ko se povečajo številne bezgavke, na koži in sluznicah se pojavijo izpuščaji; Lahko pride do poškodb notranjih organov in živčnega sistema. Obstaja sekundarni sveži in sekundarni ponavljajoči se sifilis. Z vsakim naslednjim recidivom postane intenzivnost izpuščaja manj izrazita, obdobja med recidivi pa se povečajo. Elementi izpuščaja vsebujejo veliko število živih treponemov; v tem obdobju je bolnik najbolj nalezljiv. Trajanje sekundarnega sifilisa je do 4 leta ali več. Nato bolezen preide v dolgo asimptomatsko obdobje, po katerem se po nekaj letih razvije terciarni sifilis. V tem primeru opazimo hude organske poškodbe notranjih organov, kardiovaskularnega sistema, centralnega živčnega sistema, kosti, nastanejo dlesni, ki jih spremlja razpad tkiva in degenerativne spremembe. Značilna klinična značilnost sifilisa je odsotnost subjektivnih pritožb bolnika (bolečina, srbenje, pekoč občutek itd.).

Imuniteta. Proti sifilisu ni naravne ali umetne imunosti; Obstaja samo nalezljiva imunost in dokler ta obstaja, človek praktično ni dovzeten za novo okužbo. Infekcijska imunost se razvije 10–11 dni po pojavu trdega šankra (imuniteta na šankroid v tem obdobju ponovne okužbe ni opaziti ali pa je novonastali šankr neuspešen (superinfekcija); Kasneje, med superinfekcijo, narava nastalih lezij ustreza stopnji bolezni v času ponovne okužbe. Superinfekcijo razložimo z začasno oslabitvijo ali "razpadom" nalezljive imunosti. Reinfekcijo je treba razlikovati od superinfekcije, to je nove, ponovne okužbe osebe, ki je predhodno imela (ozdravljena) sifilis in je zato izgubila imunost na okužbo. Opisani so celo trije primeri sifilisa. Inkubacijska doba pri takšnih bolnikih je krajša, večkratni ulcerozni šankr z limfadenitisom se razvije pogosteje, serološke reakcije postanejo pozitivne prej. V sekundarnem obdobju se papule na koži pogosto erodirajo. To je razloženo z dejstvom, da se pri sifilisu razvije preobčutljivostna reakcija zapoznelega tipa, po zdravljenju senzibilizirani limfociti ostanejo v telesu dolgo časa. Infekcijska imunost je nesterilne narave in jo povzročajo humoralni dejavniki: v serumu bolnika najdemo imunoglobuline razredov G, A in M.

Laboratorijska diagnostika. Za diagnosticiranje sifilisa je optimalen integriran pristop, ki vključuje hkratno uporabo več metod. Tradicionalno jih delimo na neposredne, ki omogočajo dokazovanje prisotnosti patogena v proučevanem materialu (okužba živali, različne vrste mikroskopije in molekularno-genetske metode odkrivanja DNK). T. pallidum– PCR in DNA sondiranje) in indirektni – serološki testi za odkrivanje protiteles. Po drugi strani pa so serološki testi predstavljeni z netreponemskimi in treponemskimi testi.

Material, ki ga je treba testirati za odkrivanje treponem z direktnimi metodami, je izcedek šankroida ali njegov punktat, punktat bezgavk, ostrgnina roseole in cerebrospinalna tekočina. Patogen je najbolje zaznati v naravnem materialu s temnopoljsko (glej sliko 111.4) ali faznokontrastno mikroskopijo, ki omogoča opazovanje različnih vrst gibanja živega patogena. Če se je zdravljenje z antibiotiki že začelo, patogena ni mogoče odkriti v patološkem materialu. Po potrebi izvedemo neposredni (ali posredni) RIF ali pa preparat obarvamo po Romanovsky-Giemsi. Te metode se uporabljajo samo za zgodnjo diagnozo sifilisa.

Serološke preiskave se lahko uporabljajo na različnih stopnjah bolezni, razen pri seronegativnem primarnem sifilisu. Običajno se uporablja kompleks seroloških reakcij. TO ne-treponemski testi z vizualno določitvijo rezultatov vključujejo: reakcijo vezave komplementa (Wassermannova reakcija = RSKk = RW) s kardiolipinskim antigenom goveje srčne mišice (navzkrižno reagirajoči antigen), reakcijo mikroprecipitacije (MR, ali RMP) - mikroreakcija s plazmo in inaktiviranim serumom; RPR - hitri test reagina v plazmi in druge reakcije. Strokovnjaki menijo, da je za množično preiskavo najbolje uporabiti dva testa: RPR in RPGA ali ELISA, saj je RPR bolj občutljiv pri primarnem sifilisu, RPGA - v kasnejših fazah bolezni in ELISA - na vseh stopnjah. Netreponemski testi z mikroskopskim odčitavanjem rezultatov vključujejo VDRL test in USR test. Netreponemski testi se uporabljajo kot presejalni testi, saj lahko dajo lažno pozitivne rezultate. IN treponema testi uporabljajo antigene treponemskega izvora. Uporabljajo se za potrditev rezultatov netreponemskih testov (lažno pozitivnih?) pri kliničnem, epidemiološkem in anamnestičnem sumu na sifilis, za diagnozo latentnih in poznih oblik, za retrospektivno diagnozo. Treponemski testi vključujejo: RSKt (RSK s treponemskim antigenom), RIBT (ali RIT) - imobilizacijska reakcija treponeme pallidum, RIF (ena najboljših reakcij), RPGA, ELISA, imunobloting.

Treponema pallidum je povzročitelj sifilisa. Ta spolno prenosljiva bolezen je znana že od antičnih časov, vendar sta njenega povzročitelja odkrila šele leta 1905 avstrijska znanstvenika E. Hoffman in F. Schaudin. Imenovali so jo bleda (pallidum) spiroheta.

Treponema pallidum, ki ima zelo tanko telo v obliki spirale, zlahka prodre skozi sluznico in poškodovano kožo v človeško telo, pogosteje s spolnim stikom, tudi v sprevrženi obliki, veliko manj pogosto s stikom ali neposredno s krvjo. Treponema pallidum prizadene sluznico, kožo in notranje organe. Po obdobju razmnoževanja se na mestu vnosa patogenov sifilisa oblikuje primarni sifilom ("trda" razjeda). Potek bolezni je valovit in postopen.

Posebni spontano izginejo po manifestnem poteku in se nato ponovno pojavijo in spremenijo svojo barvo. Trajanje ponavljajočega poteka bolezni traja približno 2 leti in je najpomembnejši znak zgodnjega sifilisa. Sifilidi, brez epitelija, vsebujejo veliko število bledih treponem. Z leti se nalezljivost bolnikov s sifilisom zmanjšuje.

Treponema pallidum spada v red Spirochaetales, družino Spirochaetaceae, rod Treponema. Spirohete imajo edinstveno strukturo in morfologijo. V naravi so zelo razširjeni. To so tanke, precej dolge, prožne in mobilne bakterije. Štiri podvrste Treponema pallidum so patogene za ljudi:

• Treponema pallidum pallidum povzroča sifilis.
• Treponema pallidum pertenue je povzročitelj frembeije (nevenerični sifilis, tropski granulom).
• Treponema carateum povzroča bolezen pinta.
• Treponema pallidum endemicum je povzročitelj endemičnega sifilisa (nevenerični sifilis v otroštvu, bejel).

Bolezni, ki jih povzročajo patogeni treponemi, imajo kroničen, valovit potek. Sifilis je zelo razširjen, pint, yaws in bejel pa najdemo le v tropskih državah in imajo benigni potek.

riž. 1. Pogled na Treponema pallidum v elektronskem mikroskopu.

Stabilnost patogenov v zunanjem okolju

• Treponema pallidum je odporna na nizke temperature. Lahko prenese zmrzovanje do enega leta. Patogeni sevi patogenov so shranjeni v okolju brez kisika pri nizkih temperaturah (20 - 70 ° C) ali posušeni iz zamrznjenega stanja.
• Treponeme ohranjajo virulenco na okoljskih predmetih, dokler se ne izsušijo. Pri temperaturah do 42°C se aktivnost bakterij najprej poveča, nato pa odmrejo. Pri segrevanju na 60°C ostanejo treponemi aktivni 15 minut. Več kot 3 dni patogeni sifilisa ohranijo svoje patogene lastnosti v kadverskem materialu.
• Zunaj človeškega telesa bakterije hitro umrejo. Pri temperaturi 100 °C umrejo takoj. Treponema pallidum je občutljiva na razkužila in nekatere antibiotike.

riž. 2. Za identifikacijo bakterij se uporablja imunofluorescenčna reakcija.

Patogeni sifilisa v telesu bolnika

V tem obdobju se bakterije nahajajo v lezijah in tkivni tekočini v spiralni obliki, bolnik sam pa postane raznašalec okužbe. Bolniki so še posebej kužni v sekundarnem obdobju - obdobju ponavljajočega se sifilisa. Obdobja umirjanja bolezni so povezana z dejstvom, da je večina treponemov intracelularnih (v fagocitih). V tem stanju se bakterije ne morejo razmnoževati in širiti po telesu.

Treponema pallidum se lahko skrije pred negativnimi učinki okoljskih dejavnikov in se spremeni v L-oblike in ciste, kar pojasnjuje kronični potek bolezni. V kasnejših fazah sifilisa je nalezljivost bolnikov minimalna. Skupno število patogenov se zmanjša. Odziv telesa na okužbo je oslabljen.

riž. 3. Mikroskopija brisa, pripravljenega s posrebrenjem. Povzročitelji sifilisa so temne barve. Celice okuženih tkiv so obarvane rumeno.

Značilnosti patogena: zunanja struktura

Treponema pallidum po videzu spominja na zamašek. Ima 8 - 14 enako velikih kodrov, katerih višina se na konicah zmanjša. Spiralna oblika povzročitelja se ohrani v vseh primerih in pod vsemi pogoji. Dolžina mikroorganizma je od 5 do 15 mikronov, širina 0,2 mikrona.

riž. 4. Na fotografiji je povzročitelj sifilisa Treponema pallidum (pogled pod elektronskim mikroskopom).

"Končne" formacije

Konci večine treponem so koničasti. Imajo diskaste izrastke ( blefaroplasti) s pritrjenimi 10–11 fibrile.

Vlakna se raztezajo vzdolž telesa treponeme in se ovijajo okoli njega, kar daje bakteriji spiralno obliko. Z vsakega konca sta 2 neodvisna snopa fibril. Nahajajo se pod zunanjo steno, ki poteka nad citoplazemsko membrano. Fibrile so našli tudi pod citoplazmatsko membrano. So tanjši in številnejši. Vlakna zunanjega snopa zagotavljajo gibanje treponeme, so dvakrat debelejša. So dolge cevi, sestavljene iz beljakovine flagelin, ki je precej odporna na delovanje številnih encimov. Vlakna notranje plasti igrajo vlogo ogrodja.

Na enem koncu bakterije sta dve zaobljeni tvorbi ( spongiozno telo). Zagotavlja aktivno prodiranje bakterij v gostiteljske celice.

Treponema pallidum lahko izvaja translacijske (naprej in nazaj), rotacijske, upogibne, valovite (konvulzivne) in vijačne gibe.

riž. 5. Na fotografiji je treponema pallidum (vzgojena oblika).

riž. 6. Na fotografiji je bleda treponema s 3000-kratno povečavo (temnopoljska mikroskopija). Ta vrsta raziskav vam omogoča snemanje oblike in gibanja živih bakterij.

Notranja struktura Treponema pallidum (ultrastruktura)

Mukoproteinski "primer"

Telo bakterije obdaja sluzi podobna brezstrukturna snov (mikrokapsula). Ta mukopolisaharidna snov ščiti treponeme pred fagociti in protitelesi. Kapsularno snov proizvaja sam treponema.

Citoplazemska membrana

Citoplazemska membrana bakterij opravlja številne vitalne funkcije: transportna, zaščitna, je mesto lokalizacije antigenov in encimov, aktivno sodeluje pri delitvi celic, L-transformaciji in sporulaciji. Citoplazemska membrana ima troslojno zgradbo. Njegova notranja plast tvori številne izrastke v protoplazmatskem cilindru, zaradi česar pride do aktivnega prenosa hranil od zunaj. Življenjska aktivnost bakterij je odvisna od stanja citoplazemske membrane.

Protoplazemski valj

Protoplazemski valj se nahaja pod zunanjo steno. Struktura citoplazme Treponema pallidum je fino zrnata. Granule ribosomov in številne lamelarne strukture so potopljene v prozorno hialoplazmo. Ribosomi zagotavljajo sintezo beljakovin v bakterijski celici. Citoplazma vsebuje tudi nukleotid, ki nima omejevalne membrane. Razteza se po celotni dolžini protoplazemskega valja.

Mezosomi

Mezosomi so derivati ​​citoplazemske membrane. Zavzemajo polovico ali celotno os premera treponeme. Mezosomi oskrbujejo bakterijsko celico z energijo na točkah povečane rasti med sporulacijo in delitvijo. Njihova funkcija je podobna mitohondrijem. Mezosomi se razlikujejo po naravi strukture, vendar je njihovo število vedno zelo veliko.

riž. 7. Ultrastruktura Treponema pallidum. Mukoproteinski pokrov na vrhu, nato troslojna celična stena, v notranjosti je citoplazemska membrana in valj z nukleotidom, mezosomi, ribosomi in drugimi vključki. Na fotografiji so jasno vidne fibrile, ki tečejo vzdolž telesa bakterije.

Razmnoževanje Treponema pallidum

Razmnoževanje patogenov sifilisa se pojavi s prečno delitvijo. Delitev bakterijske celice traja približno 33 ur in se zgodi šele pri temperaturi okoli 37 °C. Včasih so bledi treponemi razdeljeni na več delov hkrati.

riž. 8. Na fotografiji je bleda treponema.

Oblike obstoja povzročiteljev sifilisa

V neugodnih pogojih (izpostavljenost antibiotikom, protitelesom, fizikalnim in kemijskim dejavnikom okolja, izčrpanost hranilnega medija) se bakterije spremenijo v L-oblike, razpadejo na zrna in tvorijo ciste in kokalne oblike. V takih oblikah lahko treponema dolgo časa obstaja v bolnikovem telesu, nato pa se obrne, kar povzroči ponovitev sifilisa.

Treponema pallidum v obliki L lahko prodre v človeško telo tudi v odsotnosti poškodbe kože in sluznice, prehaja skozi filtre, ki se uporabljajo pri zdravljenju kože.

Pri okužbi s cističnimi oblikami bakterij pride do povečanja inkubacijske dobe, pojava latentnih oblik bolezni in razvoja odpornosti na antibakterijska zdravila.

Ciste

Neugodne življenjske razmere vodijo do dejstva, da se treponema pallidum spremeni v cisto. Zvije se v kroglo, okoli nje pa se oblikuje brezstrukturna prozorna lupina (ohišje), včasih sestavljena iz več plasti. Vsi morfološki elementi patogena so ohranjeni. Obstoj cist v mirovanju pojasnjuje obstoj latentnih oblik bolezni, dolg in počasen potek ter odpornost na antibakterijska zdravila. S staranjem bolezni se število cist povečuje. Raziskovalci so dokazali, da je nastanek ciste zaščitna reakcija, ki zagotavlja preživetje in razmnoževanje povzročiteljev sifilisa.

L-oblika

Treponeme se pod vplivom številnih dejavnikov spremenijo v L-oblike. Treponeme pridobijo sferično obliko zaradi blokade sinteze, celična stena postane tanjša, razmnoževanje se ustavi, vendar se ohranita rast in intenzivnost sinteze DNA. V citoplazmi bakterij L-oblike je odkrit ogromen nukleotid, znotraj katerega je veliko število verig, ki vsebujejo DNA.

• V zgodnjih fazah sifilisa prevladujejo spiralne oblike Treponema pallidum. V tem obdobju se bakterije nahajajo zunajcelično in se intenzivno delijo, zaradi česar so ranljive za delovanje antibiotikov.
• V sekundarnem obdobju ponavljajočega se sifilisa se treponemi nahajajo ne le zunajcelično, ampak tudi znotraj fagocitov, najdemo pa tudi veliko število cist, ki so bolj odporne na zdravljenje.
• V kasnejših fazah bolezni je opazno zmanjšanje spiralnih oblik treponemov, povečanje števila cist in L-oblik. Skupno število patogenov se zmanjša. Reakcija telesa je oslabljena.

riž. 9. Bakterije so dobro vidne v brisih, pripravljenih z impregnacijo s srebrom (tehnika Levaditi).

Treponema pallidum pod mikroskopom

Citoplazma povzročiteljev sifilisa vsebuje veliko število hidrofobnih komponent, zato so slabo obarvane z anilinskimi barvili. Po metodi Romanovsky-Giemsa so bakterije obarvane bledo rožnato, zato se imenujejo "bledo treponema".

• Treponeme so jasno vidne s pomočjo faznokontrastne (temnopoljske) mikroskopije. V sveže pripravljenem brisu z živimi patogeni so v temnem polju vidne gladko upognjene spiralno oblikovane bakterije. Od saprofitskih spirohet, ki jih najdemo v ustni votlini in na sluznicah spolnih organov, se bledi treponemi razlikujejo po enakomernosti kodrov, so tanjši, izvajajo gladke valovite gibe in se lahko upognejo pod kotom.
• V brisih, pripravljenih z impregnacijo s srebrom (tehnika Levaditi), so bakterije jasno vidne. Treponeme so obarvane črno in so jasno vidne na ozadju rumeno obarvanih celic proučevanih tkiv. Srebro se odlaga na bakterijske celice in tako povečuje njihov premer.
• Za identifikacijo bakterij se uporablja imunofluorescenčna reakcija. Bakterije v brisu, obdelanem z luminiscenčnim serumom, svetijo v ultravijoličnih žarkih fluorescenčnega mikroskopa.

riž. 10. Na fotografiji je bleda treponema pod mikroskopom: impregnacija s srebrom (fotografija levo), mikroskopija v temnem polju (fotografija na sredini), reakcija imunofluorescence (fotografija desno).

Kulturne lastnosti povzročiteljev sifilisa

Treponema pallidums so obvezni anaerobi - živijo in rastejo v odsotnosti molekularnega kisika. Na umetnih hranilnih gojiščih bakterije praktično ne rastejo. Za njihovo gojenje se uporabljajo gojišča, ki vsebujejo konjski in kunčji serum, na katerem bleda treponema počasi raste in izgublja virulentne lastnosti. Rast se pojavi pri temperaturi 35 0 C. Kolonije patogenov sifilisa se pojavijo 3-5 (na nekaterih medijih 7-9) dni.

riž. 11. Fotografija prikazuje rast kolonij Treponema pallidum.

Biokemijske lastnosti Treponema pallidum

Biokemične lastnosti povzročiteljev sifilisa so bile malo raziskane. Številni sevi proizvajajo vodikov sulfid in indol. Nekateri sevi utekočinijo želatino, drugi pa glukozo, saharozo, galaktozo in maltozo, da tvorijo kislino. Nekateri sevi samo razgradijo glukozo. Več sevov patogenov je podvrženih hemolizi človeških rdečih krvnih celic.

riž. 12. Na fotografiji je bleda treponema. Pogled pod elektronskim mikroskopom.

sifilis- kronična spolno prenosljiva bolezen, za katero je značilna zaporedna sprememba posameznih obdobij bolezni. Povzročitelj sifilisa je bil. leta 1905 odkril nemški znanstvenik Schaudin.

Morfologija in biološke lastnosti. Treponema pallidum je tanka zvita nit velikosti 15x0,25-0,5 mikronov, ki ima 8-14 enotnih spiralnih zavojev, ki se nahajajo blizu drug drugega. Težko ga je barvati z anilinskimi barvili in je zato dobil ime bleda spiroheta. Za barvanje se uporablja metoda Romanovsky-Giemsa (spirohete so obarvane bledo rožnato), negativno barvanje z raztopino črnila (spirohete ostanejo neobarvane in so vidne na temnem ozadju). Za identifikacijo spirohet v okuženih tkivih se uporablja metoda impregnacije s srebrom (metoda Levaditi), pri kateri so na ozadju celic rumenega tkiva vidne treponeme, pobarvane v črno. Pri pregledu materiala v temnem vidnem polju se bleda spiroheta razlikuje od saprofitskih spirohet, ki jih najdemo na sluznicah ustne votline in spolnih organov, z enakomernimi kodri in gladkimi valovitimi gibi.

Je tanjši od drugih treponem, sposoben se je upogniti pod kotom in izvajati značilne gibe v obliki nihala. Povzročitelj sifilisa se težko goji v anaerobnih pogojih. Za gojenje se uporabljajo gojišča, ki vsebujejo kunčji ali konjski serum (gojišča Ulengut in Terskikh). V tem primeru kulturni (dobljeni na hranilnih medijih) sevi spirohet izgubijo virulentnost in spremenijo svojo antigensko strukturo. Treponeme vsebujejo endotoksin in imajo kompleksno antigensko strukturo.

Trajnost. Bleda spiroheta zunaj pacientovih tkiv hitro umre in je nestabilna, ko je posušena, izpostavljena običajnim razkužilom in visokim temperaturam; že pri 40°C odmre po 2 urah. Je bolj odporen proti nizkim temperaturam: zdrži zmrzovanje do enega leta.

Patogenost. V naravnih razmerah živali ne trpijo zaradi sifilisa. Eksperimentalno je mogoče okužiti opice, zajce in hrčke.

Patogeneza in klinika. Vstopna mesta okužbe so sluznice in koža, ki imata največ manjših poškodb. Inkubacijska doba traja v povprečju 3-4 tedne, po kateri se začne primarno obdobje sifilisa: na mestu vstopa patogena se pojavi majhna erozija, dvignjena nad kožo, z gladkimi robovi, gladkim svetlečim dnom, roza ali rdeča, pogosto neboleča, z gostim infiltratom na dnu, zaradi česar je dobila ime "šanker". Pojavi se slabo počutje in glavobol. Bezgavke se povečajo in postanejo goste brez vidnih znakov vnetja. Praviloma niso spojeni z okoliškimi tkivi. Po 20-30 dneh se šankr zaceli.

Spirohete iz bezgavk prodrejo v kri, se razmnožujejo in vstopajo v organe in tkiva ter lahko povzročijo poškodbe. Po 6-7 tednih od začetka bolezni se razvije sekundarno obdobje sifilisa, za katerega je značilna generalizacija procesa in pojav obilnih in raznolikih izpuščajev na koži in sluznicah (sifilidi) rožnatih ali rdečih odtenkov pojavijo se v obliki rozeol, papul, veziklov, pustul. Če se zdravljenje ne izvaja, se po 2-3 letih začne tretje obdobje sifilisa - gumijasto. Pojavi se gomoljni sifilid ali globok nodularni sifilid (subkutana guma). Na koži in sluznicah se pojavijo gosti sferični tuberkuli. Lahko vztrajajo za nedoločen čas in se nato raztopijo ali razjedejo s kasnejšim nastankom brazgotin. Pri nastanku sifilične gume se v podkožnem maščobnem tkivu pojavi vozel, ki se poveča in zraste z okoliškim tkivom in kožo. Nad osrednjim delom dlesni se koža tanjša in se odpre. Guma se spremeni v gumijasto razjedo z neprijetnim vonjem: njeno dno je prekrito z nekrotično gnilobo. V nekaj mesecih se razjeda zaceli in na njenem mestu ostane umaknjena zvezdasta brazgotina. V zadnjem, četrtem, parazifiličnem obdobju, ki se lahko pojavi 10-20 let po začetku bolezni, opazimo specifične lezije centralnega živčnega sistema v obliki progresivne paralize ali tabes dorsalis.

Imuniteta. Naravne, prirojene imunosti ni: okužba vedno vodi v razvoj bolezni. Vprašanje stanja pridobljene imunosti ni bilo v celoti raziskano. Med boleznijo se razvije nesterilna imunost, ki je celične in tkivne narave. Imenuje se anti-šankroid, saj se ob ponovni okužbi med boleznijo ne pojavi nov šankr, spirohete pa se razširijo po telesu in sodelujejo pri razvoju kasnejših sifilitičnih lezij.

Mikrobiološka diagnostika. Glavne metode laboratorijske diagnostike so mikroskopske in serološke. V prvem obdobju se mikroskopija serozne vsebine šankra izvaja v temnem polju ali v brisih, obarvanih po Romanovsky-Giemsi. Izcedek kožnih lezij sekundarnega in terciarnega obdobja je prav tako podvržen mikroskopskemu pregledu. Od 5-6 tedna od trenutka okužbe ali 2-3 tedne po pojavu šankra se uporabljajo serološke diagnostične metode. Uporabljajo se RSC (Wassermannova reakcija) in sedimentne reakcije (reakcije padavin) Kahna in Sachs-Vitebskega. Wassermanovo reakcijo izvajamo z bolnikovim serumom z nespecifičnimi antigeni (alkoholni izvleček lipoidov govejega srca z dodatkom holesterola ali kardiolipinskega antigena), saj se je izkazalo, da lahko globulini v serumu bolnika s sifilisom združujejo z lipoidnimi izvlečki, pridobljenimi iz različnih organov. Poleg nespecifičnih antigenov se uporablja specifičen antigen, pridobljen iz tkiva testisov kunca, okuženega s Treponema pallidum. Če hemolize ni, se reakcija šteje za pozitivno, saj je očitno, da je komplement stopil v stik s specifičnim sistemom antigen-protitelo. Sedimentne reakcije so tehnično preproste. Njihovo bistvo je v tem, da se ob dodajanju koncentriranega lipoidnega antigena pacientovemu serumu pojavi motnost in nato oborina. Ker so antigeni v teh reakcijah nespecifični, so lahko pozitivni tudi pri drugih nalezljivih boleznih (tuberkuloza, malarija itd.).

Najbolj specifična pri serološki diagnostiki sifilisa je reakcija imobilizacije treponem (TRIT). Ta reakcija temelji na dejstvu, da ko serum bolnika s sifilisom dodamo tkivni kulturi treponem (vzgojenih v kunčjem jajčniku), izgubijo svojo gibljivost v prisotnosti komplementa. Poleg te reakcije se uporablja tudi posredni RIF. Glavne komponente za uprizoritev te reakcije so: bolnikov serum (razredčen 1:200), tkivni sev blede spirohete, anti-vrstni fluorescenčni serum proti humanim globulinom.

Edini vir okužbe je oseba v vseh obdobjih bolezni. Pot prenosa je neposreden stik z bolnikom (najpogosteje med spolnim odnosom), manj pogosto preko gospodinjskih predmetov. Možen je prenos okužbe na novorojenčka skozi placento z bolne matere.

Preprečevanje in zdravljenje. V ZSSR so bili zdravniki zadolženi za odpravo sifilisa. Za to obstajajo vsi predpogoji: stalna rast blaginje in kulturnega življenjskega standarda delavcev, pa tudi takšni nadzorni ukrepi, kot je vključevanje oseb, ki so vir okužbe, in tistih, ki so v stiku z njimi, v pregled. in zdravljenje, množične preventivne preglede in dispanzerske metode dela. Bistveno vlogo pri preprečevanju ima zgodnje prepoznavanje virov okužbe, pravočasno zdravljenje in odprava promiskuitete. Posebna profilaksa se ne izvaja.

Za zdravljenje se uporabljajo novarsenol, bizmut, živo srebro in penicilin.

PATOGENE SPIROHETE
Spirohete za razliko od bakterij predstavljajo manj pogosto skupino mikroorganizmov.
Vse spirohete ne tvorijo spor ali kapsul. Ne obarvajo se po Gramu (gram negativni). Težko ga je gojiti na hranilnih gojiščih. Spirohete – saprofite najdemo v vodnih telesih, bogatih z organskimi odpadki, v blatu, v človeški ustni votlini in črevesju. Glede na morfološke značilnosti delimo patogene spirohete v tri skupine.

1. Treponema, ki ima obliko pravilne spirale. To vključuje spiroheto sifilisa.
2. Borelije, oblikovane kot nagubana nit z zavoji in širšimi vijugami. V to skupino spadajo spirohete recidivne mrzlice in Vincentova spiroheta.
3. Leptospira, ki ima številne majhne kodre in značilne kavljaste konce (leptospirna infekcijska zlatenica).

SPIROHETA SIFILISA
Povzročitelj sifilisa je bleda spiroheta Spirochaeta pallida, ki sta jo leta 1905 prvič opisala F. Schaudin in E. Hoffmann. 2 leti prej je med eksperimentiranjem na opicah odkril spiroheto sifilisa D.K. Zabolotny.
Morfologija in tinktorialne lastnosti. Bleda spiroheta je zelo občutljiva, tanka, šibko lomljena nit z majhnimi, enakomernimi, pravilnimi zavoji (sl. 104 in 105 na vstavku).

riž. 104. Treponema pallidum v temnem polju.
V povprečju je dolga od 6 do 14 mikronov in debela 0,25 mikronov. Ime bleda je prejela zaradi slabe sposobnosti barvanja z anilinskimi barvili in slabe vidljivosti v živem stanju. Te lastnosti so posledica nizke vsebnosti nukleoproteinov in bogastva lipoidov v telesu spirohete. Za barvanje uporabite metodo Romanovskega (slika 105) ali pa ga pobarvajte po tem, ko ste ga najprej izpostavili kakšni jedki. Najboljša metoda za odkrivanje blede spirohete je preiskava v temnem polju. V svežem materialu, ko ga pregledamo v ultramikroskopu z zatemnjenim vidnim poljem, kaže bleda spiroheta aktivne gibe okoli vzdolžne osi, pa tudi translacijske in rotacijske gibe.
Gojenje. Spiroheta sifilisa se ne razmnožuje na navadnih hranilnih medijih. V. M. Aristovsky in A. A. Geltser sta uspešno uporabila tekoči hranilni medij, sestavljen iz zajčjega seruma z dodatkom koščka možganskega tkiva. Po setvi površino gojišča napolnimo z vazelinom. V kulturah so spirohete bolj grobe, krajše in se razlikujejo po polimorfizmu. Nastale kulture so brez patogenih lastnosti in se imenujejo "kulturne" v nasprotju s "tkivnimi", ki ohranjajo patogene
lastnosti in se vzdržujejo v laboratorijih s prehodi na kuncih.
Odpornost. Bleda spiroheta je slabo odporna na sušenje in visoke temperature. Segrevanje na 45-48° ga ubije v eni uri, na 55° v 15 minutah. Manj občutljiva na nizke temperature. Pri 10°C ostane sposoben preživetja do nekaj dni. Dezinfekcijska sredstva imajo uničujoč učinek. Od kemikalij ima najmočnejši učinek 1-2% raztopina fenola.
Patogenost za živali. I. I. Mechnikov in D. K. Zabolotny sta prva pridobila eksperimentalni sifilis pri opicah. Kunce lahko okužimo tako, da jim vbrizgamo patološki material v roženico, sprednji očesni prekat, kožo, sluznico itd. V tem primeru se pri živalih na mestu cepljenja pojavi primarna lezija v obliki tipične skleroze (šankroida). .
Patogeneza in klinična slika sifilisa. Edini vir okužbe je oseba s sifilisom. Bolezen se lahko prenaša tako z neposrednim stikom (najpogosteje spolno) kot s predmeti, okuženimi s sifiličnimi izločki. Prehranjevanje iz skupnih pripomočkov, uporaba skupne žlice itd. (posredni stik) lahko prispeva k širjenju sifilisa v gospodinjstvu.
Bleda spiroheta vstopi v telo skozi poškodovano sluznico in kožo. Po 3-4 tednih se na mestu vhodnih vrat pojavi primarna skleroza - šankr (razjeda z gostimi robovi in ​​dnom - od tod tudi ime šankr), ki označuje primarno obdobje sifilisa.
Nato mikrob prodre v telo po limfni in cirkulacijski poti ter se razširi po telesu – začne se drugo obdobje. Za to obdobje so značilne poškodbe kože in sluznic, na katerih se pojavijo rozeole, papule, vezikule in pustule - sifilidi. Drugo obdobje traja od 2-3 mesecev do nekaj let. Če sifilis ni bil dovolj zdravljen, se začne tretje obdobje - gumijasto. Gume (granulomi) so celične akumulacije, sestavljene iz limfocitov, epiteloidnih in plazemskih celic. Lahko so v debelini kože, sluznicah, notranjih
organi itd. Gume včasih dosežejo velike velikosti, majhne žile okoli njih se postopoma zmanjšujejo v lumnu in se sčasoma zaprejo. V zvezi s tem je prehrana celic dlesni motena in pride do njihovega globokega uničenja z nastankom razjed in brazgotin v vseh tkivih in organih.
V nekaterih primerih sifilis vstopi v četrto obdobje, za katerega so značilne lezije centralnega živčnega sistema v obliki progresivne paralize in tabes dorsalis. Klinične manifestacije sifilisa se razlikujejo po tem, da so v večini primerov nastajajoče lezije kože in sluznic neboleče, izginejo tudi brez terapevtskega posega, se ponavljajo in na koncu povzročijo hude lezije tretjega in četrtega obdobja.
Imuniteta. Pri ljudeh ni prirojene imunosti na sifilis. Prenesena bolezen tudi ne pušča tiste vrste pridobljene imunosti, ki je značilna za večino nalezljivih bolezni. Med sekundarno okužbo bolnika s sifilisom spirohete ne umrejo, ampak vztrajajo in se širijo po telesu ter okužijo organe in tkiva skupaj s preživelimi spirohetami primarne okužbe. Vendar pa pri sekundarni okužbi s sifilisom primarna oblika reakcije - šankr - ni. To imunološko stanje se imenuje "shanker imunost".
Z "imunostjo" pri sifilisu mislimo na imunološko prestrukturiranje telesa, zaradi česar se spremeni narava patoloških sprememb in sama klinična slika. Kar se tiče mehanizma te "imunosti", ga ne povzročajo humoralni dejavniki, čeprav v serumu bolnikov najdemo protitelesa (lizine, aglutinine).
Laboratorijska diagnostika. V prvem obdobju sifilisa se diagnoza postavi z bakterioskopskim pregledom v temnem polju ali z obarvanimi brisi materiala iz šankra.
Za raziskavo je potrebno ekstrahirati tkivno tekočino iz globokih delov lezije, ki vsebuje večje število spirohet. V ta namen najprej temeljito obrišemo površino šankra s sterilno palčko, namočeno v fiziološko raztopino, nato pa z rahlim stiskanjem dna razjede iz njega iztisnemo majhno količino tkivne tekočine. Če to ne uspe, razdražimo dno razjede z rahlim strganjem s skalpelom ali ostro žlico. Nastalo tekočino odsesamo s Pasteurjevo pipeto.
Kapljico tekočine je najbolje pregledati v temnem polju, kjer je jasno vidna morfologija svetlo osvetljenih spirohet in njihovo značilno gibanje.
Saprofitne spirohete, ki jih najdemo na genitalijah in v ustni votlini (na genitalijah - Sp. refringens, v ustni votlini - Sp. microdentium), se razlikujejo od bledih spirohet po svoji morfologiji in vzorcu gibanja. Sp. refringens ima bolj grobo telo z velikimi kodri, nima gibanja naprej, Sp. microdentium se razlikuje od blede spirohete po naravi svojega gibanja.
Pripravite lahko tudi brise s črnilom Burri (glej stran 51), kjer je na črni podlagi jasno vidna oblika sivobelih spirohet in njihovih kodrov.
Za pregled barvnega pripravka pripravimo tanke razmaze: kapljico tekočine nanesemo na predmetno stekelce in jo z robom drugega stekla razporedimo po površini (enako kot pri pripravi razmaza iz kapljice krvi). Brise posušimo na zraku, fiksiramo v metilnem alkoholu in obarvamo 12-15 ur po Romanovskem (str. 52): bleda spiroheta postane rožnata, kar omogoča razlikovanje od drugih saprofitnih spirohet, ki postanejo modre (glej Slika 105).

riž. 105. Bleda spiroheta v izcedku šankra. Barvanje po Romanovskem.

Tako dolgotrajno obarvanje pripravka je razloženo z dejstvom, da bleda spiroheta ne sprejema dobro anilinskih barvil.
V drugem obdobju sifilisa, ko se na koži in sluznicah pojavijo sifilidi, vzamemo tudi tkivni sok iz obolelih mest in ga pregledamo na prisotnost spirohet.
Po 4-5 tednih od začetka okužbe lahko opravimo serološki test, ki je najpogostejša metoda za diagnosticiranje sifilisa.
Serodiagnoza sifilisa temelji na Wassermanovi reakciji in reakcijah usedline.
Wassermanova reakcija. Tehnika Wassermanove reakcije se ne razlikuje od tehnike reakcije fiksacije komplementa. Bistvena razlika je način priprave antigenov, pa tudi njihova titracija.
Lipoidni izvlečki iz patoloških ali normalnih tkiv se uporabljajo kot antigeni za Wassermannovo reakcijo. Tako imenovani specifični antigeni, pripravljeni iz sifilitičnih organov, se odlikujejo po večji aktivnosti, zaradi česar njihov titer običajno doseže tisočinke mililitra (titer 0,007, 0,05 na 1 ml itd.). Nespecifični antigeni so manj aktivni, zato je njihov titer nižji in je znotraj stotink mililitra (npr. titer 0,01, 0,02 na 1 ml).
Pri izvajanju Wassermanove reakcije se uporabljajo 3 antigeni (št. 1, 2 in 3 kardiolipin). Antigen št. 1 specifičen. Vsebuje lipide sifilitične spirohete, pridobljene z ekstrakcijo iz tkiva testisov kunca, okuženega s sifilisom. Antigena št. 2 in 3 sta nespecifična in vsebujeta normalne tkivne lipide (alkoholne izvlečke srčne mišice goveda z dodatkom 0,25-0,3% holesterola). Kardiolipinski antigen je prečiščen pripravek, treba ga je hitro razredčiti, po redčenju pa mora biti rahlo opalescenten, vendar ne moten. Titer antigena je količina le-tega v 1 ml fiziološke raztopine, ki ob prisotnosti hemolitičnega sistema in komplementa ne zadrži hemolize.
Na primer, če je na ampuli naveden titer antigena 0,05 ml, to pomeni, da je treba med delovanjem antigen razredčiti s fiziološko raztopino tako, da je 0,05 ml antigena na ml tekočine.

Ker imajo lahko antigeni različne antikomplementarne lastnosti, pred izvedbo Wassermannove reakcije komplement titriramo ne le v čisti obliki, temveč tudi v prisotnosti antigenov. Ker se Wassermanova reakcija izvaja s 3 antigeni, je treba komplement titrirati z vsakim antigenom posebej.
Modifikacija Wassermanove reakcije - Grigoriev-Rapoportova reakcija (Tabela 25). Ta reakcija temelji na uporabi komplementarne aktivnosti testnega seruma. Reakcija uporablja (najkasneje 36 ur po prejemu) bolnikov aktivni (neogrevan) serum. Za izvedbo reakcije so potrebni antigeni, hemolitični serum in defibrinirana, neoprana ovčja kri, filtrirana skozi dve plasti gaze.

Shema Grigoriev-Rapoportove reakcije

V primerih, ko v serumski kontroli ni hemolize, reakcijo ponovimo in 0,2 ml seruma, ki je očitno aktiven, dodamo 0,2 ml testnega seruma in zato ustrezno zmanjšamo volumen dodane fiziološke raztopine.
Rezultati poskusa se upoštevajo takoj po koncu reakcije na podlagi odčitkov prvih dveh epruvet, ki vsebujeta antigen. Za pozitiven rezultat je značilna popolna zamuda hemolize, negativen rezultat - popolna hemoliza. V kontrolnem serumu (3. epruveta brez antigena) naj bi prišlo do popolne hemolize.

Poleg teh reakcij se za serodiagnozo sifilisa pogosto uporabljajo sedimentne reakcije, katerih bistvo je interakcija pacientovega inaktiviranega seruma z antigenom, zaradi česar se v epruveti tvori oborina. Od teh sta najbolj razširjeni reakciji Kahn in Sachs-Vitebsky.
Kahnova reakcija. Za izvedbo Kahnove reakcije so potrebne naslednje sestavine: 1) inaktiviran krvni serum bolne osebe, 2) poseben Kahnov antigen in 3) fiziološka raztopina.
Kahnov antigen je izvleček lipoidov iz mišic ovčjega srca, ki mu je dodan holesterol. Pred poskusom, odvisno od titra, navedenega na etiketi, se antigen razredči na naslednji način. V eno čisto in suho epruveto vlijemo antigen, v drugo pa fiziološko raztopino v količini, ki je navedena na etiketi (1-1.1-1.2). Nato fiziološko raztopino iz druge epruvete hitro vlijemo v prvo, ki vsebuje antigen (in ne obratno). Dobljeno zmes premešamo, prelijemo iz epruvete v epruveto 6-8 krat in pustimo 10 minut pri sobni temperaturi, da dozori.
Postavitev poskusa. V stojalo je nameščenih šest aglutinacijskih epruvet. Prve tri epruvete (1., 2. in 3.) so poskusne, naslednje tri (4., 5. in 6.) so kontrolne (kontrola antigena). Razredčen antigen po zorenju vnesemo z mikropipeto v 3 epruvete in 3 kontrolne epruvete. Mikropipeto z antigenom je treba spustiti na dno suhe epruvete, ne da bi se dotaknila njenih sten; to zagotavlja natančnost merjenja antigena. V 1. epruveto vlijemo 0,5 ml, v 2. 0,025 ml in v 2. 0,0125 ml antigena, enako količino antigena vlijemo v 3 kontrolne epruvete. Vsem epruvetam dodamo 0,15 ml testnega seruma, kontrolnim pa enako količino fiziološke raztopine. Stojalo z epruvetami močno stresamo 3 minute, da se serum pomeša z antigenom, in postavimo v termostat pri 37° za 10 minut. Ko ga vzamemo iz termostata, v prvo poskusno in prvo kontrolno epruveto dodamo 1 ml fiziološke raztopine, v drugo in tretjo poskusno in kontrolno pa po 0,5 ml fiziološke raztopine. Vsebino epruvet ponovno pretresemo in upoštevamo rezultate reakcij (Shema Kahnove reakcije je prikazana v tabeli 26).
Opomba. Za poljubno število testnih serumov se izvede ena kontrola antigena. V primerih pozitivne reakcije se opravi kontrola seruma. V ta namen ga vlijemo v epruveto v količini 0,1 ml, dodamo 0,3 ml fiziološke raztopine in stresamo tri minute.
Reakcijo zabeležimo s prostim očesom, z uporabo povečevalnega stekla ali aglutinoskopa.
Tabela 26
Cahnova reakcijska shema

Pri upoštevanju reakcije s prostim očesom se vsaka epruveta odstrani s stojala in rahlo nagnjena drži nekoliko nad višino oči pred virom svetlobe. Obarjanje kosmičev (oborine) v epruvetah s testnim serumom služi kot pokazatelj pozitivne Kahnove reakcije in je označeno s plusi. Ostro pozitivno reakcijo označujejo štirje plusi (+ + + +) - zanjo je značilna izguba jasno vidnih kosmičev v vseh epruvetah in rahlo opalescentna tekočina. Pozitivna reakcija je označena s tremi plusi (+ + +) in je značilna manj izrazita precipitacija kosmičev v vseh epruvetah. Za šibko pozitivno reakcijo, označeno z dvema plusoma (+ +), je značilna šibkejša tvorba usedline in prisotnost majhnih delcev v motni tekočini. Nastajanje zelo majhnih suspendiranih delcev v motni tekočini je označeno z enim plusom (+). Odsotnost usedline in prosto suspendiranih delcev v tekočini je pokazatelj negativne reakcije in je označena z minusom (-). V kontrolnih epruvetah ne sme biti opaziti kosmičev.
SEDIMENTNA REAKCIJA CITOHOLA (Tabela 27) po Sachs-Vitebskem. Za to reakcijo potrebujete inaktiviran testni serum in citoholični antigen Sachs-Vitebsky, ki je izvleček lipoida iz mišic srca goveda, ki mu je dodan holesterol.
Tabela 27
Shema citoholne Sachs-Vitebskyjeve reakcije

Treponema pallidum - povzročitelj sifilisa je vključen v rod Treponema (iz latinskega trepo - obrat, nemo - nit).

T. pallidum je odkril F. Schaudin leta 1905. I. I. Mečnikov, P. Ehrlich, D. K. Zabolotny in drugi so veliko prispevali k preučevanju sifilisa.

Morfologija. T. pallidum je spiralno oblikovana nit, ki meri 8-18 × 0,08-0,2 µm z majhnimi enakomernimi kodri. Število kodrov je 12-14. Konci treponeme so koničasti ali zaobljeni. Treponeme so mobilne. Imajo štiri vrste gibanja. Po Romanovsky-Giemsa so pobarvani v bledo rožnato barvo, zato se imenujejo T. pallidum - bleda treponema. Slabo obarvanje je razloženo z nizko vsebnostjo nukleoproteinov. Spirohete lahko odkrijemo v preparatih, obarvanih z Burrijem in srebrom. Poleg tega jih preučujejo v živem stanju – v temnem polju.

Povzročitelji sifilisa nimajo spor ali kapsul (glej sliko 4).

Gojenje. Treponema pallidum je zelo zahtevna glede hranilnih medijev. Na umetnih hranilnih gojiščih rastejo le ob prisotnosti koščkov zajčjih možganov ali ledvic in ascitne tekočine. Rastejo počasi, 5-12 dni pri temperaturi 35-36 ° C v anaerobnih pogojih. Treponema pallidum se dobro razmnožuje v piščančjem zarodku (s prečno delitvijo). Pri gojenju na umetnih hranilnih medijih treponemi izgubijo virulentnost. Take kulture imenujemo kulturne. Kulture, vzgojene v piščančjem zarodku, imenujemo tkivne kulture. Običajno ostanejo virulentni.

Encimske lastnosti Treponeme nimajo. Vendar pa se kulturni sevi razlikujejo po sposobnosti proizvajanja indola in vodikovega sulfida.

Tvorba toksinov. Ni nameščeno.

Antigenska struktura. Treponema pallidum vsebuje več antigenskih kompleksov: polisaharid, lipide in beljakovine. Seroskupine in serovarji niso bili ugotovljeni.

Odpornost na okoljske dejavnike. Treponema pallidum ni odporna. Temperatura 45-55°C jih ubije po 15 minutah. Odporne so na nizke temperature. Zamrznjeni so shranjeni do enega leta. Spirohete so občutljive na soli težkih kovin (živo srebro, bizmut, arzen itd.). Redne koncentracije razkužil jih uničijo v nekaj minutah. Občutljivi so na benzilpenicilin, bicilin itd. Pod vplivom nekaterih okoljskih dejavnikov in antibakterijskih zdravil lahko treponema tvori ciste. V tej obliki ostanejo v telesu dolgo časa v latentnem stanju.

Občutljivost živali. V naravnih razmerah živali ne trpijo zaradi sifilisa. Vendar pa je pri opicah, kot sta pokazala I.I. Mechnikov in E. Roux, mogoče reproducirati klinično sliko sifilisa: na mestu injiciranja se oblikuje šankr. Dokazano je, da se pri okužbi kuncev in morskih prašičkov na koži na mestu injiciranja ali drugje pojavijo razjede. Izolirani sev treponeme se lahko v kuncih med pasažo ohrani dolgo časa.

Viri okužbe. Bolan človek.

Prenosne poti. Gospodinjski stik (neposredni stik), predvsem spolni stik. Včasih se sifilis lahko prenaša preko predmetov (posoda, perilo). Z matere s sifilisom se bolezen preko posteljice prenese na otroka (kongenitalni sifilis).

Patogeneza. Vhodna vrata so sluznice genitalnega trakta in ustne votline.

Primarno obdobje - spirohete vstopijo v sluznico in po inkubacijski dobi (v povprečju 3 tedne) na mestu penetracije nastane razjeda, za katero so značilni gosti robovi in ​​dno - šankr. Nastanek trdega šankra spremlja povečanje bezgavk. Primarno obdobje traja 6-7 tednov.

Sekundarno obdobje - povzročitelji sifilisa se širijo po telesu skozi limfne in cirkulacijske poti. V tem primeru se na koži in sluznicah oblikujejo roseole, papule in vezikule. Trajanje tega obdobja je 3-4 leta.

Tretje obdobje - se razvije z nezdravljenim sifilisom. V tem obdobju nastanejo granulacijski izrastki v organih, tkivih, kosteh in posodah - gumi ali gumijasti infiltrati, nagnjeni k razpadu. To obdobje lahko traja več let (v latentni obliki). Bolnik v tem obdobju ni kužen. Pri nezdravljenem sifilisu (v nekaterih primerih) lahko po več letih pride do poškodbe centralnega živčnega sistema: pri poškodbi možganov - progresivna paraliza, pri poškodbi hrbtenjače - tabes dorsalis. Te bolezni se pojavijo, ko so treponemi lokalizirani v možganskem tkivu, kar vodi do hudih organskih in funkcionalnih sprememb v telesu.

Imuniteta. Naravne imunosti ni. Pri okužbi s sifilisom se razvije "nesterilna" nalezljiva imunost. Imenuje se šankroid, saj pri ponavljajoči se okužbi ne nastane trdi šankr, ampak se razvijejo vsa naslednja obdobja. Pri sifilisu se odkrijejo IgC in IgM ter reagini IgE, ki vežejo komplement v prisotnosti kardiolipidnega antigena.

Preprečevanje. Sanitarno vzgojno delo, zgodnje odkrivanje bolnikov s sifilisom. Specifična preventiva. Ni razvito.

Zdravljenje. Penicilin, bicilin, biokinol itd.

Varnostna vprašanja

1. Opišite morfologijo spirohet in metode barvanja.

2. Kaj je šankr?

3. Kateri material za raziskave boste vzeli v različnih obdobjih bolezni s sifilisom?

4. Kakšna je imuniteta za sifilis?

Mikrobiološka preiskava

Namen študije: odkrivanje treponema pallidum in serodiagnostika.

Material za raziskovanje

1. Vsebina šankra (primarno obdobje).

2. Vsebina roseole, papule, vezikle (sekundarna doba).

3. Kri (sekundarna, tretja in četrta menstruacija).

Osnovne raziskovalne metode

1. Mikroskopski.

2. Imunofluorescenčna reakcija (RIF).

3. Serološki: 1) Wassermanova reakcija (WRS);

2) sedimentne reakcije.

4. Reakcija imobilizacije treponeme (TRI).

Serološka diagnoza

Wassermanova reakcija. Reakcija poteka po principu reakcije fiksacije komplementa (tabela 52). Razlikuje se po tem, da lahko Wassermanova reakcija uporablja nespecifični antigen. Na primer, lipoidni ekstrakt govejega srca je srčni antigen. Zaradi nespecifičnosti protiteles, ki reagirajo s tem antigenom, jih imenujemo reagini. Reakcija z nespecifičnim antigenom je razložena z dejstvom, da se vsebnost globulinov v bolnikovem krvnem serumu poveča in stopnja njihove disperzije se spremeni. Globulini v kombinaciji z lipidnimi ekstrakti tvorijo kompleks, ki veže komplement in zato ne pride do hemolize (v hemolitičnem sistemu). Odsotnost hemolize - pozitivna reakcija - serološko potrdi diagnozo sifilisa. Pri izvajanju seroloških reakcij je potrebna tudi uporaba specifičnih antigenov iz tkivnih treponem in kulturnih.

Opomba. 1) ++++ popolna zamuda hemolize; - hemoliza; 2) antigen št. 1 nespecifičen (lipoidna frakcija govejega srca); 3) specifični antigeni št. 2 in 3, pripravljeni iz kultur treponeme.

Sedimentne reakcije. 1. Kahnova reakcija. Pacientov serum se inaktivira pri 56 °C 30 minut. Antigenu (ekstrakt lipidov govejega srca) dodamo 0,6 % holesterola, da povečamo občutljivost reakcije (tabela 53).

Obračunavanje rezultata: pojav padavin je označen kot pozitivna reakcija.

2. Reakcija Sachs-Vitebsky (citoholna sedimentna reakcija) je modifikacija Kahnove reakcije. Avtorji so uporabili bolj koncentriran antigen, ki so mu dodali holesterol, ki spodbuja hitrejše nastajanje oborine.

Reakcija imobilizacije treponeme (TRIT). To je najbolj specifična reakcija pri diagnosticiranju sifilisa.

Metoda za to reakcijo je zdaj razvita: suspenzijo treponem dobimo iz zdrobljenega kunčjega testisa, okuženega s T. pallidum, in shranimo v posebnem mediju, ki ne zavira gibljivosti treponem. V epruveto dodamo 1,7 ml suspenzije tkivnih treponem, dodamo 0,2 ml testnega seruma in 0,1 ml svežega komplementa.

Kontrole: v 1. epruveto namesto testnega seruma dodamo serum zdrave osebe; v 2. - vlijemo inaktiviran serum morskega prašička. Vse epruvete postavimo v eksikator ali anaerostat, napolnimo z mešanico plinov (1 prostornina ogljikovega dioksida in 19 prostornin dušika) in postavimo v termostat pri 35 ° C. Nato preučevani material nanesemo na steklo in mobilnost treponem preučujemo v temnem polju. Načelo reakcije je, da serum bolnika s sifilisom v prisotnosti komplementa zavira gibanje treponeme pallidum. Določi se odstotek imobiliziranih treponem.

Rezultat se šteje za pozitivnega, če je imobiliziranih treponem nad 50 %; šibko pozitivno - od 30-50%; negativno - pod 20%.

Varnostna vprašanja

1. Kateri material se uporablja za laboratorijsko diagnozo sifilisa v različnih obdobjih bolezni?

2. Kakšne so laboratorijske metode preiskav za diagnosticiranje sifilisa?

3. Katere antigene je treba uporabiti pri izvajanju Wassermannove reakcije?

4. Katere sestavine so potrebne za izvedbo reakcije imobilizacije treponeme (TRI)? Kakšno gradivo je vzeto iz predmeta, kaj je v njem določeno?

domov » Gala » Značilno število kodrov za povzročitelje sifilisa. Treponema pallidum - povzročitelj sifilisa