Opredelitev ifa. Encimski imunski test krvi - opis metode, prednosti in slabosti, razlaga rezultatov

Namen preiskave krvi za sifilis je odkriti protitelesa, ki bi jih telo lahko proizvedlo za boj proti njegovemu povzročitelju Treponema pallidum.

Lažno pozitiven test za sifilis se lahko pojavi v primerih, ko je prišlo do proizvodnje antigenov iz drugih razlogov.

Lažno pozitiven sifilis se diagnosticira v 10% primerov.

Ker je test za sifilis predpisan ne le, če ima bolnik pritožbe, ampak med zdravniškim pregledom, pred zaposlitvijo, med nosečnostjo, pred hospitalizacijo, je visok odstotek okužbe pri ljudeh, ki sploh niso sumili na prisotnost takšne bolezni. .

Za odpravo napak je potrebno zagotoviti zanesljivost dobljenih rezultatov.

Pozitivni rezultati za sifilis so razdeljeni v dve skupini: akutni in kronični. Akutni lažno pozitiven rezultat se pojavi v 6 mesecih rednega testiranja.

  • akutne nalezljive bolezni;
  • poškodbe;
  • morebitno cepljenje 1-7 dni pred odvzemom vzorca;
  • akutna zastrupitev.

V prisotnosti katerega od dejavnikov v telesu se aktivira proces proizvodnje protiteles, kar se odraža v rezultatih testa.

Če obstajajo kronične težave, lahko test kaže napačne rezultate 6 mesecev ali več.

  • motnje vezivnega tkiva;
  • katera koli oblika tuberkuloze;
  • kronične jetrne motnje;
  • HIV, hepatitis B, C, D in druge virusne bolezni;
  • avtoimunski procesi v telesu.

Rezultat postane napačen zaradi sistematičnega nastajanja nespecifičnih protiteles kot odgovor na eno od naštetih motenj.

Kaj storiti, če se odkrije lažni sifilis

Če želite ugotoviti, ali je test za sifilis morda napačen, morate oceniti prisotnost drugih dejavnikov pri manifestaciji bolezni in verjetnosti okužbe.

Treponema pallidum je povzročitelj, ki se ob stiku z okuženo osebo spolno prenaša preko sluznice genitalij, ust in danke. Možen je tudi prenos z okužene matere na otroka.

Inkubacijska doba, v kateri se bolezen ne čuti, je 2-6 tednov. Po tem se na mestih možne okužbe oblikujejo sifilitične razjede z gosto bazo.

Po 1-2 tednih se bezgavke, ki so najbližje mestu lezije, povečajo in postanejo boleče.

Pri diagnosticiranju lažno pozitivnega sifilisa se morate vrniti v zdravstveno ustanovo. Hkrati obvestite o vseh zdravilih, ki ste jih jemali na predvečer testa, kroničnih in akutnih boleznih.

Če ste imeli nezaščiten spolni odnos z nepreverjenim partnerjem ali ste odkrili prve znake bolezni, o tem obvestite zdravnika.

Po zbiranju anamneze in opravljenem pregledu vam bo zdravnik predpisal vrsto testov, ki vam bodo omogočili določitev točnega rezultata z napako manj kot 1%.

Vrste testov za sifilis

Obstajata dve vrsti testov: netreponemski in treponemski. Prva možnost vključuje uporabo umetnih analogov Treponema pallidum; v drugem primeru se uporabljajo pravi treponemi.

Netreponemske metode

Takšne tehnike so zelo razširjene in se najpogosteje uporabljajo pri rutinskih zdravniških pregledih.

Prednost so nizki stroški, hitri rezultati in možnost izvajanja raziskav s standardno laboratorijsko opremo.

Analiza na RW

Za njegovo izvedbo se bolniku vzame kri, manj pogosto cerebrospinalna tekočina. Kri lahko odvzamemo iz prsta ali vene. Napaka pri izvedbi takšne študije je lahko do 7%.

Precipitacijska mikroreakcija (MR ali RMP)

Lahko vključuje dve vrsti testov za sifilis RPR in VDRL. Kot posledica razgradnje celic pod vplivom treponeme nastanejo antilipidna protitelesa.

Lipidi se lahko uničijo pod vplivom drugih motenj, zato je stopnja napake pri izvajanju VDRL in RPR 1-3%.

Treponemski testi

Takšne študije se ne izvajajo v vseh klinikah in zahtevajo drago opremo.

Zato se uporabljajo ob sumu na prisotnost bolezni na podlagi rezultatov netreponemskih testov. Napaka takih študij je manjša od 1%.

Omogoča določanje antigenov in protiteles. Za določitev rezultata bolnik daruje kri iz prsta ali vene. Posledično tudi testiranje pomaga določiti stopnjo bolezni.

Test sifilisa RPHA vam omogoča, da določite odstotek adhezije rdečih krvnih celic. Natančen rezultat reakcije pasivne hemaglutinacije lahko dobimo 28. dan po okužbi.

Encimski imunski test določa prisotnost in stopnjo bolezni na podlagi ravni imunoglobulinov različnih vrst.

Najbolj natančen test za odkrivanje patogene DNK. Uporablja se v redkih primerih, saj zahteva kompleksne reagente.

Verjetnost napake testov RIF, RPGA, ELISA je manjša od 1%. Pri PCR je lahko napaka 0-1%.

Pozitiven rezultat na sifilis pri nosečnicah

Pri nosečnicah lahko pri izvajanju netreponemskih testov opazimo napačen rezultat v 1,5% primerov. Analiza za to vrsto bolezni je obvezna v celotni nosečnosti.

Prvi test za sifilis se opravi pri 12 tednih, nato pri 30 tednih in pred porodom. Rezultat je lahko napačen zaradi naravnih sprememb v telesu in zlasti imunosti za zaščito rastočega ploda.

Zato se med nosečnostjo lahko predpiše ponovni test, tudi če so prvi rezultati negativni, če obstaja dejavnik tveganja.

Lahko se predpišejo tudi treponemalni testi, saj je učinek bolezni na otrokovo telo bolj uničujoč kot zdravljenje z antibiotiki, če je diagnoza potrjena.

Šibek pozitiven test

Če obrazec z rezultati, ki ga prejmete, vsebuje 1-2 plusa, lahko to pomeni prisotnost majhne količine protiteles. Ti rezultati se lahko pojavijo v več primerih:

  • nedokončano inkubacijsko obdobje;
  • pozna oblika, po 2-4 letih;
  • ostankov protiteles po zdravljenju bolezni.

V tem primeru je potreben ponovni pregled po 2 tednih.

Kako se pravilno pripraviti na teste

Če je bil opravljen napačen test za sifilis, vam bodo dali ponovni test. Da bi bili njegovi rezultati čim bolj natančni, se je treba ustrezno pripraviti.

  • Pred analizo je dovoljeno piti samo vodo, jesti je prepovedano;
  • opustite alkohol in kajenje 1 uro pred 24 urami;
  • če darujete kri iz vene, pred tem počivajte 10 minut;
  • Če so se nalezljive bolezni poslabšale, se pojavi menstruacija ali je bil bolnik dan prej izpostavljen rentgenskim žarkom, se krvni test za sifilis ne opravi.

Na seznamu kontraindikacij so tudi številna zdravila, zato o zdravilih, ki jih jemljete, obvestite zdravnika, če se zdravite.

Če je bolezen potrjena

Če je po več pregledih, vključno s treponemskimi testi, rezultat pozitiven, je vredno sprejeti številne ukrepe:

  • o tem obvestite svojega spolnega partnerja, potrebno je, da tudi on opravi pregled;
  • bližnji sorodniki morajo opraviti pregled;
  • potrebno je izvajati preventivno zdravljenje ljubljenih;
  • Med celotnim potekom zdravljenja je treba izdati bolniško odsotnost in se izogibati tesnim stikom z drugimi ljudmi, da preprečimo prenos okužbe;
  • Ob koncu zdravljenja se izda potrdilo, ki ga je treba priložiti zdravstveni kartoteki in predložiti pri izvajanju testov na protitelesa, tako da diagnostiki nimajo vprašanj o pojavu antigenov v rezultatih.

Pri postavljanju diagnoze so podatki zaupni. Pri bolniškem dopustu se ne razkrije, v vseh dokumentih, ki jih izda bolnišnica, se o tej diagnozi ne obvesti ljudi, ki nimajo tesnega stika z bolnikom.

Po zdravljenju je bolnik popolnoma varen, prebolevanje sifilisa ne more biti razlog za zavrnitev zaposlitve ali uveljavljanja drugih človekovih pravic.

Če je diagnoza potrjena v zgodnjih fazah, je verjetnost popolne ozdravitve 100%. Treponema pallidum je ena redkih, ki v dolgoletnem zdravljenju bolnikov s penicilinom ni razvila zaščite pred njim.

Zato se bolniki zdravijo z zdravili na osnovi derivatov penicilina. Če pride do primarne oblike bolezni, je treba v 3 mesecih diagnosticirati in zdraviti vse spolne partnerje, ki jih je imela okužena oseba.

Sifilis po zdravljenju v začetni fazi ne pušča zapletov. Bolezen lahko povzroči invalidnost, če je kronična ali če je okužba v maternici.

pozitiven na sifilis

Vprašanja in odgovori na: če je pozitiven na sifilis

Vprašanje dr. Sukhovu Yu.A.
zdravo Na spletni strani Health of Ukraine sem vam že zastavil vprašanje zelo na kratko. V celoti bom napisal svojo zgodbo. Prosimo, posvetujte se. Katere druge teste je treba opraviti?
Pred 2 leti je bil odprt priložnostni spolni stik.
Po 1,5 mesecih se je začela nekakšna groza: dolgotrajna vročina, kot da bi se v ščitnici dogajalo nekakšno delo, nekaj je brnelo, nato glavoboli, vnetje mandljev, hude bolečine v kosteh in mišicah, najprej zbadanje v naravi, potem kot vrela voda teče skozi mišice, slabost, enkratni izpuščaj, pogoste akutne respiratorne virusne okužbe, ki se dolgo časa ne odzivajo na zdravljenje, zasoplost, težko dihanje, slab zadah, nevralgija, nočno potenje, huda šibkost, zmanjšana zmogljivost. Skoraj sem se spremenil v truplo. Pred tem sem bila zdrava in uspešna punca, profesionalno sem se ukvarjala s plesom, bila sem fizično precej vzdržljiva in aktivna. Skoraj nikoli nisem bil prehlajen, bil sem praktično zdrav.
1 leto in 10 mesecev po nezaščitenem spolnem odnosu sem bil v 2 različnih ELISA laboratorijih negativen na HIV.
Hepatitis B in C negativen.
EBV PCR negativen
CMV PCR negativen
Herpes virus tipa 6 negativen
Toksoplazmoza PCR negativna
Sifilis negativen
SPO negativen.

Splošni krvni test: ESR 30; ostalo je normalno.
Biokemija je pozitivna CRP, ostalo je normalno.

Kaj naj storim? Sem že obupana, testirala sem se že na vse okužbe, a naj še enkrat opravim test za HIV. Nekateri simptomi so izginili, vendar se počutim zelo slabo, huda nevralgija, ponoči potenje v predelu prsnega koša. Mogoče moram opraviti še nekaj preiskav ti? Prepričan sem, da me je ta mladenič okužil, nikoli več ga nisem videl. pomoč. Prosim za nasvet, kaj storiti?

pozdravljena
Stara sem 31 let in sem noseča 35 tednov. Pred 2 mesecema sem darovala kri za okužbe z ELISA metodo (ker sem končala z bruhanjem na infekcijskem oddelku, kjer so naredili test), ginekologinja me ni napotila na krvodajalstvo za okužbe v zgodnji nosečnosti. (kar se mi zdi nenavadno, čeprav je v nosečnosti trikrat testirana kri za aids in sifilis, vse negativno). Sedaj sem bil obveščen o rezultatih. Prosim za komentar. Nekateri indikatorji so alarmantni, kot so virus ošpic, CMV, herpes HSV 1/2, okužba z virusom Epstein-Barr (EBV):

Rdečke Ig G K=2,0
CMV Ig G K=4,1
Herpes HSV Ig G tip 1 K=3,4, tip 2 negativno.
Epstein-Barr VCA K=4,7 NA —
klamidija in mikoplazma - negativni.

Moja usmeritev pravi naslednje:
Koeficient pozitivnosti K = optična gostota vzorca. Če je K manjši od 0,9, je rezultat negativen, če je K od 0,9 do 1,1, je dvomljiv, če je K večji od 1,1, je pozitiven.
Vrednosti Ig G, EBV, NA do 55 cu/ml so lahko normalne, nad to vrednostjo je rezultat pozitiven.
Prosim za komentar! Hvala za pozornost!

Dekodiranje rezultatov testa za sifilis

Sifilis je resna, zelo nalezljiva bolezen. Za prepoznavanje bolezni se uporabljajo krvne preiskave (venske in kapilarne), v nekaterih primerih pa se pregleda cerebrospinalna tekočina. Razlago testa sifilisa opravi lečeči zdravnik. Bolnik lahko samostojno vidi in razume nekatere simbole v analizi, vendar mora končni sklep o prisotnosti ali odsotnosti bolezni dati usposobljen zdravnik.

Možen je lažno pozitiven ali lažno negativen test za sifilis.

Dolgo časa je bil sifilis nevarna bolezen, ki je ni bilo mogoče pozdraviti. Sodobna medicina ima vsa sredstva za popolno ozdravitev bolezni. Prej ko je postavljena diagnoza in odkrita bolezen, lažje jo bo zdraviti. Okužba s sifilisom se pojavi ne samo s spolnim stikom, ampak tudi z uporabo istih gospodinjskih predmetov z bolnikom (zobna ščetka, brisača, kuhinjski pripomočki itd.). Zato se vsaki osebi priporoča občasna hitra preiskava krvi za sifilis.

Pri okužbi se povečajo bezgavke v predelu dimelj, pojavijo se razjede in kožni izpuščaji v ustih in na spolovilu. Če opazite prve znake bolezni, se morate takoj posvetovati z zdravnikom. Pregled je lahko anonimen z napotnico ginekologa, urologa, proktologa, venerologa ali rednega terapevta. Po opravljenem testu se morate obrniti na svojega zdravnika za prepis testa za sifilis.

Namen izpita

Med zdravniškim pregledom lahko zdravnik pogosto naroči številne laboratorijske preiskave, vključno s testom za sifilis. Te napotitve ne smemo razumeti kot sum bolezni. Na številnih področjih javnega življenja je potrebno potrdilo o odsotnosti bolezni.

  • Načrtovanje družine
  • Prijava v hostel
  • Dostop do delovnega mesta za zdravstvene delavce, gostinsko osebje itd.
  • Darovanje organa ali krvi
  • Bolniki, ki so spolno aktivni
  • Prisotnost kliničnih simptomov
  • Konec zdravljenja sifilisa

Kot primarna študija je praviloma predpisan eden od nespecifičnih (netreponemskih) testov. Zanesljivost takih testov je relativno nizka in bolnik lahko prejme lažno pozitiven rezultat. V tem primeru bo predpisana ponovna študija z uporabo specifičnega (treponemskega) testa. Pozitiven ali negativen test mora pregledati lečeči zdravnik.

Priprave na test

Pred dajanjem krvi iz prsta ali vene za laboratorijsko testiranje se morate držati nekaterih pravil, da bo analiza čim bolj zanesljiva. 8-12 ur pred odvzemom krvi ne smete uživati ​​hrane, čaja ali kave. Dan pred obiskom laboratorija ni priporočljivo jesti začinjene, mastne, ocvrte, slane ali prekajene hrane. Tudi antibiotiki in druga zdravila lahko vplivajo na test. Vse zaužite snovi je treba sporočiti svojemu zdravniku. Morda vam bo priporočil, da se vzdržite opravljanja testa za 1 ali več tednov. Vzorec krvi lahko vzamete v zasebnem laboratoriju, okrožni kliniki ali pokličete zdravstvenega delavca na dom.

V vsakem primeru se uporablja sterilna oprema in rokavice za enkratno uporabo.

Hitri test za sifilis lahko opravite neodvisno doma. Lekarne ponujajo posebne teste s podrobnimi navodili v ruskem jeziku. Rezultat testa je znan v 10 minutah. En rdeč trak na indikatorju je negativen test za sifilis, dva pa sta pozitivna. Zanesljivost takih testov ni dovolj visoka in ne morejo služiti kot potrditev diagnoze.

Kako razumeti rezultat nespecifičnega pregleda

Bolniki se po testu pogosto počutijo negotovi. Darovati kri in ne znati sami dešifrirati testa za sifilis je seveda neprijetno. Dešifriranje krvnega testa zahteva medicinsko izobrazbo in ustrezno usposobljenost zdravnika ter upoštevanje vseh dejavnikov, ki vplivajo na rezultat. Ali lahko bolnik sam prebere rezultate testa za sifilis? Po ogledu laboratorijskega izvida lahko naredite preproste zaključke, vendar mora zdravnik potrditi ali ovreči diagnozo.

Test toluidin rdečega ni predpisan za diagnozo, temveč za preverjanje učinkovitosti zdravljenja bolezni. študija pokaže, koliko se je število protiteles spremenilo v primerjavi s prejšnjo analizo. Če se je število zmanjšalo, je zdravljenje uspešno. Analiza se izvaja večkrat med zdravljenjem, kot je predpisal zdravnik. 3 mesece po zaključku postopkov se izvede kontrolno testiranje.

Netreponemski testi (RSKk, RMP in RPR) so pogosto predpisani med zdravniškimi pregledi in kot hitra diagnoza. Kot rezultat raziskav obstaja več možnosti zapisa. Njihovo dešifriranje je precej preprosto:

  • »–« negativen rezultat
  • "+", "1+") ali "++", "2+" šibko pozitivna analiza
  • "+++", "3+" ali "++++", "4+" pozitiven test za sifilis

Oba rezultata sta lahko lažno pozitivna ali lažno negativna za sifilis. V odsotnosti kliničnih simptomov in občasnega spolnega stika lahko zdravnik negativen rezultat sprejme kot pravilnega. Pozitivno reakcijo običajno preverimo s treponemskim testom.

Posebni rezultati študije

Treponemski testi so zapleteni in dragi v primerjavi z netreponemskimi testi. Za diagnosticiranje sifilisa se uporablja več vrst testov: RSCT, RIBT, RIF, RPGA, ELISA in imunobloting). Ena od natančno specifičnih študij je analiza RIBT. Rezultat testa lahko laboratorij sporoči v odstotkih.

  • 20 % ustreza negativnemu rezultatu (»–«)
  • 21-30% dvomljive analize ("++" ali "2+")
  • 31-50% šibko pozitivno ("+++", "3+")
  • 51 % ali več ustreza pozitivnemu rezultatu

Imunobloting je eden od sodobnih in natančnih načinov diagnosticiranja bolezni. Običajno je predpisano za potrditev ali zavrnitev rezultatov prve študije. Odkrivanje protiteles IgG in IgM v krvi je označeno s črtami. Rezultati testa se interpretirajo v primerjavi z netreponemskim testom.

Če sta oba izvida negativna, je bolnik zdrav ali pa je okužba v prvem tednu razvoja. Oba pozitivna izvida kažeta na prisotnost sifilisa ali druge, morda avtoimunske bolezni.

Pozitivni imunoblot test po negativni netreponemski študiji kaže na prisotnost sifilisa, avtoimunske bolezni ali raka.

Pri nosečnicah lahko pride do pozitivne reakcije. Negativen imunoblot test po pozitivni netreponemski študiji pomeni odsotnost bolezni.

Zanesljivost analiz

Vedno obstaja možnost, da je rezultat testa napačen. Pri razlagi testov za sifilis je treba posebno pozornost nameniti zunanjim dejavnikom, na katere bolnik nima vpliva. Laboratorijski tehnik, ki izvaja raziskavo, ali pacient lahko naredi napako tudi, če se nepravilno pripravi na odvzem krvi ali zdravniku ne posreduje resničnih podatkov o sebi. Lažno pozitiven rezultat je možen pod vplivom naslednjih dejavnikov:

  • Sladkorna bolezen katere koli vrste
  • Prisotnost zdravil v krvi
  • Zastrupitev z alkoholom
  • Nalezljive bolezni (ošpice, hepatitis, mononukleoza itd.)
  • Benigne ali maligne neoplazme
  • bolezni srca
  • Jemanje antibiotikov ali nedavno cepljenje
  • Avtoimunske bolezni (eritematozni lupus, revmatoidni artritis itd.)
  • Nosečnost
  • Uživanje mastne, začinjene ali slane hrane dan pred odvzemom krvi

Odvisno od stopnje bolezni nekateri testi morda ne zaznajo bolezni. Tako se Wassermanova reakcija (RSKt in RSKk) izvede le 3-4 tedne po možni okužbi z verjetnostjo 100% ob prisotnosti terciarnega sifilisa bo zanesljivost le 75%. Za diagnosticiranje zgodnjih stopenj bolezni je priporočljivo uporabiti test ELISA. Test je encimski imunski test z visoko občutljivostjo na protitelesa. Zanesljivost rezultata je blizu 100%; lažno pozitiven rezultat je izključen.

Negativni rezultati testiranja na spolno prenosljive bolezni pomenijo, da je oseba zdrava. Vprašljiv test za sifilis bo vodil do ponovnega pregleda. Če obstajajo dejavniki, ki bi lahko vplivali na končni zaključek, na primer prisotnost drugih bolezni, bo zdravnik spremenil parametre testa. Pozitiven rezultat testa za sifilis ni smrtna obsodba ali razlog za paniko. S pomočjo zdravil se lahko bolezen popolnoma pozdravi. Vendar je treba zapomniti, da so bolezni v zgodnji fazi veliko lažje ozdravljive.

ELISA za sifilis: metoda analize, razlaga, razlogi za lažno pozitivne rezultate

Seznam standardnih diagnostičnih ukrepov, ki se uporabljajo za nalezljive bolezni, vključuje encimski imunski test. Če je test ELISA pozitiven na sifilis, ne zganjajte takoj panike.

Oglejmo si podrobneje značilnosti te raziskovalne tehnike in načela interpretacije rezultatov, pridobljenih pri različnih kategorijah bolnikov.

Bistvo študije

Encimski imunski test je ena najpogostejših metod za diagnosticiranje nalezljivih bolezni. Spada v kategorijo treponemskih testov, to pomeni, da se lahko uporablja za ugotavljanje prisotnosti povzročitelja sifilisa - treponema pallidum - v bolnikovem telesu.

Z metodo ELISA se sifilis odkrije z odkrivanjem protiteles proti treponemi. Vsebujejo jih pacientova kri, njihova vrsta in količina pa sta odvisna od stopnje in oblike bolezni, kar omogoča pridobitev pomembnih informacij o trenutnem stanju človekovega zdravja.

Prednosti in slabosti

ELISA je zelo pogosto predpisana za sum sifilisa ali drugih nalezljivih bolezni. To je posledica dejstva, da analiza omogoča natančno določitev vrste in stopnje bolezni, njena zanesljivost pa ostaja na visoki ravni - verjetnost napake na podlagi rezultatov več študij je le 1%, primarni ELISA ima natančnost približno 90%.

Uporaba visokokakovostnih reagentov in sodobne opreme nam omogoča maksimalno natančnost indikatorjev.

Na splošno so prednosti metode:

  1. Visoka natančnost rezultatov. Verjetnost prejema lažnih podatkov je zelo majhna.
  2. Zmanjšanje človeškega dejavnika vpliva. Sodobna oprema za izvajanje ELISA odpravlja človeški vpliv na rezultate študije zaradi avtomatizacije procesa.
  3. Identifikacija specifičnih protiteles. Nemogoče je zamenjati antigene ene vrste z drugimi, zato analiza pokaže natančen rezultat za določeno diagnozo.
  4. Beleženje najmanjših odstopanj od norme. Tudi najmanjša koncentracija patoloških povzročiteljev ne bo ostala neopažena.

Ne smemo pozabiti na slabosti te metode. ELISA ima naslednje pomanjkljivosti:

  1. Visoka cena. Visoki stroški so posledica številnih dejavnikov, zlasti potrebe po dobri opremi, visokokakovostnih reagentih in strokovnjakih z zadostno stopnjo usposobljenosti.
  2. Potreba po predhodni diagnozi. Vedeti morate, katere antigene iskati, saj brez dodatnih podatkov ne bo mogoče postaviti natančne diagnoze.
  3. Verjetnost lažno pozitivnega rezultata. Določena telesna stanja in drugi dejavniki lahko popačijo končne podatke.

Indikacije za uporabo

Zdravnik lahko predpiše encimski imunski test za diagnosticiranje ne le sifilisa, temveč tudi številnih drugih nalezljivih bolezni.

Če obravnavamo situacijo neposredno z okužbo s treponemo, je razlog za pregled lahko:

  • pojav zunanjih simptomov bolezni (šankre, sifilitični izpuščaj, gumi itd.);
  • znatno zmanjšanje imunosti;
  • odkrivanje ali sum na sifilis pri spolnem partnerju, ljubljenih in družinskih članih;
  • pozitivna reakcija med drugimi testi;
  • prepoznavanje drugih bolezni, ki so lahko povezane s sifilisom;
  • osebna želja osebe po pregledu.

Metode izvajanja

ELISA se lahko izvaja na različne načine. V vsakem posameznem primeru je izbrana najprimernejša možnost.

Najprej obstaja delitev metod na:

  1. Kakovostno. Zazna se prisotnost okužbe ali virusa v bolnikovem telesu.
  2. Kvantitativno. Določa koncentracijo protiteles proti patogenu v človeškem telesu, kar kaže na stopnjo in intenzivnost razvoja bolezni.

Obstaja tudi klasifikacija metod za izvajanje ELISA, ki temelji na načelu reprodukcije zahtevane reakcije.

Obstajajo 3 možnosti:

  1. Neposredno. Označena protitelesa se vbrizgajo v priložene vzorce krvi.
  2. Indirektno z antigeni. Sorbirane antigene najprej namestimo v celice polistirenske plošče, namenjene za ELISA test. Nato se jim dodajo virusna protitelesa, kar izzove nastanek imunskih kompleksov, potrebnih za nadaljnjo oceno rezultatov.
  3. Indirektno s protitelesi. Ta metoda se pogosto uporablja za spolno prenosljive bolezni. Gre za predhodno absorpcijo protiteles, šele nato se v tableto dodajo antigeni.

Pravila zbiranja materiala

Da bi zmanjšali tveganje za nezanesljive rezultate, je treba pravilno darovati kri za analizo.

Preden opravite test ELISA, morate upoštevati nekatere omejitve:

  • izogibajte se intenzivnemu fizičnemu in čustvenemu stresu;
  • prenehajte kaditi in piti alkohol vsaj 1-3 dni;
  • nekaj dni morate preiti na pravilno prehrano;
  • Ženskam je priporočljivo nadzorovati fazo menstrualnega cikla, saj lahko hormoni izkrivljajo rezultate;
  • zadnji obrok naj bo 8-10 ur pred darovanjem krvi;
  • 10 dni pred jemanjem zdravil, ki lahko vplivajo na rezultate študije, so izključeni.

Za ELISA se venska kri odvzame iz ulnarne vene, darovati jo je treba zjutraj na prazen želodec. Na splošno veljajo standardna pravila za pripravo na odvzem venske krvi. Glede na prisotnost katere bolezni se testira, se lahko uvedejo dodatne zahteve za predhodno pripravo bolnika.

Metodologija

Navodila za izvedbo ELISA so precej preprosta:

  1. Pacientu se vzame kri iz vene.
  2. Odvzeti material pripravimo in razdelimo na vzorce na posebni paleti z drobnimi mrežami.
  3. Antigene mešamo s protitelesi po izbrani metodi.
  4. Reakcija se oceni. Vzorce primerjamo s kontrolnimi vzorci ter rezultate kvalitativno in kvantitativno ocenimo.
  5. Podatki se vnesejo v posebno tabelo s priloženimi kvantitativnimi indikatorji (skupna protitelesa).
  6. Rezultate interpretira lečeči zdravnik. Po potrebi je predpisano ustrezno zdravljenje.

Po pregledu pacient prejme dokument z izvidi. Videti je kot tabela z ustreznimi simboli nasproti vsake vrste imunoglobulina na presečišču z imeni nalezljivih bolezni.

Dekodiranje

Samo specialist bo lahko pravilno dešifriral rezultate testa. Težko je sam ugotoviti, kaj na primer pomeni rezultat ELISA k = 1 4 Sifilis se lahko pojavi tudi v različnih oblikah, kar se odraža tudi v končnih podatkih.

Rezultati kažejo na 3 vrste imunoglobulinov:

  1. IgM. Omogoča vam določitev trajanja okužbe s sifilisom. Pozitiven rezultat kaže na poslabšanje bolezni. Njihova odsotnost lahko kaže na remisijo kroničnih patologij ali latentno obliko bolezni.
  2. IgA. Označuje bolezen, ki je minila več kot mesec dni od okužbe. Je tudi znak akutne faze bolezni, tako pri navadnih patologijah kot pri napredovalih kroničnih.
  3. IgG. Je znak vrhunca bolezni, to je njenega poslabšanja. Pri sifilisu se pozitivna reakcija pojavi nekaj časa po zdravljenju. Pri nekaterih vrstah bolezni je to lahko znak razvite imunosti.

Te snovi proizvaja telo v določenem zaporedju, kar je dodaten znak bolezni. Kvalitativni testi določajo le prisotnost imunoglobulinov v krvi posamezne vrste.

To se odraža v spremembi barve materialov, vključenih v analizo. Kvantitativni indikatorji so pomožni, natančneje opišejo stanje. Razmerje med antigeni in protitelesi kaže na resnost bolezni in intenzivnost odziva telesa.

Kaj narediti

Če ima bolnik res sifilis, se absolutno vedno odkrije pozitiven rezultat ELISA, med takšno študijo je nemogoče ne opaziti prisotnosti treponemov. Ne obupajte, bolezen je zelo ozdravljiva, zlasti v začetnih fazah.

Kaj storiti, če so rezultati testa pozitivni:

  • po navodilih zdravnika opravite dodatne preglede;
  • opravite tečaj antibiotične terapije v skladu z izbranim režimom;
  • usmerite svoja prizadevanja v krepitev imunskega sistema;
  • obvestite svojega spolnega partnerja o bolezni;
  • v prihodnosti redno opravljati preventivno diagnostiko do odjave v dispanzerju (po 5 letih, če ni pozitivnih rezultatov testa).

Ni vam treba odlašati z bolniško odsotnostjo in se bati objave rezultatov. Diagnoza je šifrirana in ostane tajna, le če obstaja nevarnost okužbe za druge ljudi, je treba o težavi obvestiti sorodnike in spolne partnerje, da opravijo potrebne preiskave.

Lažno pozitiven rezultat in njegovi vzroki

Včasih so rezultati drugih testov in ELISA zabeleženi kot lažno pozitivni za sifilis. Zato je priporočljivo izvesti 2-3 pomožne metode in čez nekaj časa ponoviti encimski imunski test.

Takšne netočnosti so redke; v glavnem so posledica naslednjih dejavnikov:

  • nosečnost;
  • kronične bolezni;
  • nedavno cepljenje;
  • poškodbe.

Lažno pozitivne rezultate delimo na akutne in kronične, odvisno od narave dejavnika, ki jih je izzval.

Popolna interpretacija testov za sifilis

Testi za sifilis: vrste testov, razlaga rezultatov, razlogi za lažno pozitivne in lažno negativne rezultate preiskav.

Sifilis je spolno prenosljiva bolezen, ki jo povzroča bakterija Treponema pallidum (bleda treponema). Več o poteh prenosa sifilisa, njegovih simptomih in možnih zapletih si preberite v članku Vse o sifilisu. Simptomi in zdravljenje.

Pravočasno odkrivanje sifilisa (s posebnimi testi) omogoča zdravnikom, da pravočasno začnejo zdravljenje in preprečijo razvoj nevarnih zapletov te bolezni.

Testiranje na sifilis med nosečnostjo pomaga preprečiti rojstvo otrok s prirojenim sifilisom. Več informacij o testih za sifilis med nosečnostjo je opisano v članku Vse o diagnostiki in zdravljenju sifilisa med nosečnostjo.

Zakaj so mi predpisali test za sifilis?

V veliki večini primerov zdravniki nimajo možnosti pridobiti natančnih podatkov o spolnem življenju pacientov (nekateri prikrivajo podrobnosti svojega spolnega življenja ali podcenjujejo tveganje za okužbo s spolno prenosljivimi boleznimi). Zato, da bi ljudi zaščitili pred morebitnimi posledicami lastne neprevidnosti ali pomanjkanja medicinskega znanja, zdravniki v nekaterih primerih predpišejo tako imenovane presejalne teste za sifilis (torej teste, ki jih opravi veliko število ljudi).

Zdravnik vam lahko naroči preiskave za sifilis, tudi če nimate simptomov bolezni in ste prepričani, da se niste mogli okužiti z njo.

Potreba po teh testih je posledica dejstva, da se sifilis včasih prenaša z vsakodnevnim stikom (ne s spolnim stikom) in se pojavlja v latentni obliki (to je brez simptomov).

Praviloma je presejalni pregled predpisan v naslednjih primerih:

  1. Pri prijavi na delovno mesto (zdravstveni delavci, gostinski delavci, vojaško osebje ipd.)
  2. Pri prijavi nosečnosti.
  3. Med sprejemom v bolnišnico, med pripravami na operacijo.
  4. Krvodajalci.
  5. Osebe, zaprte v krajih odvzema prostosti.

Zdravnik vam lahko naroči tudi teste za sifilis:

  1. Ko se odkrijejo simptomi bolezni (običajno izpuščaj na genitalnem področju).
  2. Po prejemu pozitivnih rezultatov presejalnih testov za sifilis.
  3. Če ste imeli spolni stik z osebo, ki je imela diagnozo sifilis.
  4. Novorojenčki, katerih matere imajo sifilis.

Poleg tega se testi za sifilis izvajajo občasno med zdravljenjem (za zagotovitev učinkovitosti zdravljenja) in tudi po koncu zdravljenja za spremljanje ozdravitve.

Kateri testi se uporabljajo za diagnosticiranje sifilisa?

Z diagnostiko in zdravljenjem sifilisa se ukvarja dermatovenerolog. Za diagnosticiranje bolezni se lahko uporabijo naslednji testi:

Inšpekcija kože, zunanjih in notranjih spolnih organov se izvaja za identifikacijo glavnih simptomov sifilisa: šankr, otekle bezgavke, kožni izpuščaji itd. (glej Simptomi sifilisa)

Da bi odkrijte Treponema pallidum, zdravniki pregledajo pod mikroskopom brise (ali ostrgnine), pridobljene iz razjed, bezgavk, amnijske tekočine pri nosečnicah itd. Krvi se ne pregleduje pod mikroskopom.

Pomembno: če je bila pri vaših preiskavah pod mikroskopom odkrita Treponema pallidum, to pomeni, da imate zagotovo sifilis. Če pa preiskave pokažejo, da povzročitelj sifilisa ni odkrit, ne morete biti popolnoma prepričani, da sifilisa ni. Da bi se prepričali, da niste bolni, morate opraviti dodatne teste, ki so opisani spodaj.

PCR (verižna reakcija s polimerazo) je zapletena in draga metoda za diagnosticiranje sifilisa, ki omogoča odkrivanje DNA Treponema pallidum v krvi ali drugih testnih materialih (plodovnica, cerebrospinalna tekočina). Če test PCR daje negativen rezultat, potem najverjetneje nimate sifilisa. Če pa dobite pozitiven rezultat (to je, če je PCR odkril DNK Treponeme pallidum v krvi), ni 100% zagotovila, da ste bolni. To je posledica dejstva, da PCR včasih daje lažno pozitivne rezultate (daje pozitiven rezultat v odsotnosti bolezni). Zato, če PCR daje pozitiven rezultat, je priporočljivo dodatno opraviti druge metode testiranja za sifilis (na primer imunofluorescenčno reakcijo (RIF) in test pasivne hemaglutinacije (RPHA)).

Kaj je serološki test za sifilis?

Serološka analiza je odkrivanje v krvi posebnih beljakovin (protiteles), ki nastajajo v človeškem telesu kot odgovor na okužbo. V nasprotju s prejšnjimi diagnostičnimi metodami serološki testi ne odkrijejo Treponeme pallidum same, temveč le njene »sledi« v telesu.

Če so v vaši krvi odkrita protitelesa proti Treponema pallidum, to pomeni, da ste trenutno okuženi s sifilisom ali da ste ga že imeli.

Kateri testi kažejo, da ima oseba sifilis?

Serološki testi za sifilis so razdeljeni v 2 veliki skupini: nespecifični in specifični testi. Glavna razlika med tema testoma je v tem, da nespecifični testi pokažejo pozitiven rezultat le, če ima oseba trenutno sifilis in postanejo negativni po zdravljenju, medtem ko specifični testi ostanejo pozitivni tudi po ozdravljeni bolezni.

Z drugimi besedami, negativen rezultat nespecifičnega testa je neko zagotovilo, da ste zdravi.

Kateri testi za sifilis so nespecifični (netreponemski)?

Nespecifični testi vključujejo reakcijo mikroprecipitacije (MR) in Wassermanovo reakcijo (RW). Ti testi se uporabljajo za odkrivanje sifilisa. Po ozdravitvi sifilisa postanejo ti testi negativni pri 90 % ljudi.

Kako ti testi delujejo: Zaradi vitalne aktivnosti Treponema pallidum (s sifilisom) celice v telesu umrejo. Kot odgovor na uničenje celic imunski sistem proizvaja posebne beljakovine (protitelesa ali imunoglobuline). Nespecifični testi so namenjeni identifikaciji teh protiteles in izračunavanju njihove koncentracije (določanje titra protiteles).

Precipitacijska mikroreakcija (MR) in njegovi analogi v nekaterih državah: hitri reaginski test (RPR, Rapid Plasma Reagins) in Test VDRL (Laboratorij za raziskave spolnih bolezni) so netreponemski testi, ki so predpisani za odkrivanje sifilisa.

Kaj bo pregledano:

običajno 4-5 tednov po okužbi.

Če test pokaže pozitiven rezultat, potem obstaja možnost, da imate sifilis. Ker lahko ta test daje lažno pozitivne rezultate, je priporočljivo, da opravite dodatno testiranje z uporabo posebnih testov, opisanih spodaj. Negativen rezultat kaže na odsotnost sifilisa ali zgodnjo fazo bolezni (pred pojavom protiteles v krvi).

če v krvi najdemo protitelesa v titru od 1:2 do 1:320 ali več, to pomeni, da ste okuženi s sifilisom. Pri poznem sifilisu je lahko titer protiteles nizek (kar ocenjujemo kot vprašljiv rezultat).

Lažno pozitivni rezultati MR se pojavijo v približno 2-5% primerov, tukaj so njihovi možni vzroki:

  1. Sistemske bolezni vezivnega tkiva (sistemski eritematozni lupus, skleroderma, revmatoidni artritis, dermatomiozitis, vaskulitis itd.)
  2. Nalezljive bolezni: virusni hepatitis, infekcijska mononukleoza, tuberkuloza, nekatere črevesne okužbe itd.
  3. Vnetne bolezni srca (endokarditis, miokarditis).
  4. Sladkorna bolezen.
  5. Nosečnost.
  6. Nedavno cepljenje (cepljenje).
  7. Uporaba alkohola, drog itd.
  8. Prejšnji in ozdravljeni sifilis (pri približno 10% ljudi, ki so bili zdravljeni, lahko MR test ostane pozitiven vse življenje).

Kaj bi lahko bili razlogi za lažno negativne rezultate: test lahko napačno pokaže negativen rezultat, če kri vsebuje veliko protiteles, če je test opravljen v zgodnji fazi bolezni, preden se protitelesa pojavijo, ali pri poznem sifilisu, ko je protiteles v krvi malo.

Wassermanova reakcija (RW, RW) je netreponemski test, ki se uporablja za odkrivanje sifilisa v državah CIS.

Kaj bo pregledano: kri (iz prsta ali iz vene), cerebrospinalna tekočina.

Koliko časa po okužbi postane test pozitiven? običajno 6-8 tednov po okužbi.

Kako oceniti rezultate analize:»-« je negativna reakcija, »+« ali »++« je šibko pozitivna reakcija, »+++« je pozitivna reakcija, »++++« je močno pozitivna reakcija. Če je Wassermanova reakcija pokazala vsaj en plus, potem morate opraviti dodatne teste za sifilis. Negativna reakcija ni zagotovilo, da ste zdravi.

Kako oceniti dobljeni titer protiteles: Titer protiteles od 1:2 do 1:800 kaže na prisotnost sifilisa.

Kaj bi lahko bili razlogi za lažno pozitivne rezultate: Wassermanova reakcija lahko napačno daje pozitiven rezultat iz istih razlogov kot reakcija mikroprecipitacije (MR), pa tudi, če ste tik pred darovanjem krvi za analizo pili alkohol ali jedli mastno hrano.

Zaradi velikega števila napačnih rezultatov se Wassermanova reakcija (RW, RW) vse manj uporablja in jo nadomeščajo druge, bolj zanesljive diagnostične metode.

Nespecifični testi (precipitacijska mikroreakcija (MR) in Wassermanova reakcija (RW)) so dobri metodi za diagnosticiranje sifilisa. Negativen rezultat testa najverjetneje pomeni, da ste zdravi. Če pa so rezultati teh testov pozitivni, je potrebna dodatna preiskava s specifičnimi (treponemskimi) testi.

Kateri testi za sifilis so specifični (treponemski)?

Treponemski testi vključujejo naslednje teste: imunofluorescenčno reakcijo (RIF), imunobloting, reakcijo pasivne aglutinacije (RPGA), reakcijo imobilizacije pallidum pallidum (TPI), encimski imunski test (ELISA).

Posebni testi so predpisani za ljudi, ki imajo pozitivne rezultate mikroprecipitacijske reakcije (MR) ali Wassermanove reakcije (WR). Specifični testi ostanejo pozitivni še dolgo po ozdravitvi sifilisa.

Kako ti testi delujejo: Ko patogeni sifilisa vstopijo v telo, imunski sistem proizvaja protitelesa, namenjena boju proti bledi treponemi. Ta protitelesa se v krvi ne pojavijo takoj po okužbi, ampak šele nekaj tednov kasneje. Približno konec drugega tedna po okužbi se v krvi pojavijo protitelesa IgM. Protitelesa tega razreda kažejo na nedavno okužbo s sifilisom, vendar brez zdravljenja ostanejo v krvi več mesecev in celo let (medtem ko se njihovo število postopoma zmanjšuje). 4-5 tednov po okužbi s sifilisom se v krvi začnejo odkrivati ​​protitelesa drugega razreda, IgG. Protitelesa te vrste ostanejo v krvi več let (včasih vse življenje). Testi za treponemo lahko odkrijejo prisotnost protiteles (IgM in IgG) v krvi za boj proti bledi treponemi.

Imunofluorescenčna reakcija (RIF) oz Fluorescentno treponemsko protitelo (FTA in njegova različica FTA-ABS) je treponemski test, ki se uporablja za potrditev diagnoze sifilisa v najzgodnejših fazah (še preden se pojavijo prvi simptomi).

Kaj bo pregledano: krvi iz vene ali prsta.

Koliko časa po okužbi postane test pozitiven?: običajno po 6-9 tednih.

Kako oceniti rezultate analize: Rezultati analize so predstavljeni v obliki minusov ali plusov (od ena do štiri). Če test pokaže znak minus, pomeni, da protitelesa niso bila zaznana in ste zdravi. Prisotnost enega ali več plusov kaže na prisotnost sifilisa.

Kaj bi lahko bili razlogi za lažno pozitivne rezultate: Lažno pozitivni rezultati so redki, možne pa so napake pri ljudeh z boleznimi vezivnega tkiva (sistemski eritematozni lupus, dermatomiozitis itd.), pri nosečnicah itd.

Reakcija pasivne aglutinacije (RPGA), oz Hemaglucijski test s treponemo pallidum (TPHA) je poseben test, ki se uporablja za potrditev diagnoze sifilisa v skoraj vseh fazah.

Kaj se pregleduje?: kri iz vene ali prsta.

Koliko časa po okužbi postane test pozitiven? običajno v 4 tednih.

Kako oceniti rezultate analize: pozitiven rezultat RPGA pomeni, da imate sifilis ali da ste zdravi, vendar ste to bolezen imeli v preteklosti.

Kako oceniti dobljeni titer protiteles: Glede na titer protiteles lahko približno predvidevamo trajanje okužbe s sifilisom. Kmalu po prvem vstopu treponeme v telo je titer protiteles običajno nižji od 1:320. Višji kot je titer protiteles, več časa je minilo od okužbe.

Encimski imunosorbentni test (ELISA), oz Encimski imunski test (EIA), oz ELISA (encimsko vezan imunosorbentni test) je treponemski test, s katerim potrdimo diagnozo in določimo stopnjo sifilisa.

Kaj bo pregledano: krvi iz vene ali prsta.

Koliko časa po okužbi postane test pozitiven?že 3 tedne po okužbi.

Kako oceniti rezultate analize: pozitiven rezultat ELISA pomeni, da imate sifilis ali da ste že imeli to bolezen. Ta test lahko ostane pozitiven tudi po zdravljenju.

Določitev trajanja okužbe s sifilisom z ELISA: Glede na to, katere razrede protiteles (IgA, IgM, IgG) najdemo v krvi, lahko sklepamo, kako dolgo je bila okužba.

Članek je bil napisan na podlagi gradiva s spletnih mest: sifilis24.ru, www.health-ua.org, krov.expert, zppp.su, polismed.ru.

Analiza ELISA (encimski imunosorbentni test) je sodoben diagnostični postopek, katerega namen je odkrivanje specifičnih protiteles proti povzročiteljem številnih bolezni v krvi, določanje stopnje razvoja patologije in njene etiologije. Uporablja se kot metoda spremljanja poteka zdravljenja in njegove učinkovitosti. Med raziskovalnim procesom se analizirajo kvalitativni in kvantitativni kazalci.

Metoda ELISA je zelo informativna; točnost rezultatov je več kot 96%. Diagnostika je na voljo v skoraj vseh laboratorijih in zdravstvenih ustanovah.

Glavne indikacije

Za potrditev prisotnosti spolno prenosljivih nalezljivih bolezni je predpisan encimski imunski test:

  • trihomonijaza;
  • klamidija;
  • ureaplazmoza;
  • sifilis itd.

ELISA se uporablja tudi za diagnosticiranje virusnih bolezni:

  • herpes;
  • herpes tipa 4 (virus Epstein-Barr);
  • virusni hepatitis;
  • okužba s citomegalovirusom.

Kako se pripraviti na raziskavo

Biološki material za raziskave je kri. Nekaj ​​​​dni pred testom ne smete jemati zdravil. Antibiotike, antihelmintike in protivirusna zdravila prenehamo jemati v 14 dneh.

Material se zbira zjutraj na prazen želodec. Uro pred postopkom je dovoljeno piti kozarec mirne vode;

Značilnosti analize

Za izvedbo študije se odvzame venska kri v prostornini najmanj 5 ml. V nekaterih primerih se kot biomaterial uporablja cerebrospinalna tekočina, amnijska tekočina ali vsebina steklastega telesa.

Vzorčenje krvi se izvaja z injekcijsko iglo, strogo na prazen želodec, da se izognemo lažno pozitivnim rezultatom. 12 ur prej morate prenehati kaditi in piti alkoholne pijače. Pri uporabi narkotičnih snovi so rezultati analize izkrivljeni.

Če zaključek kaže negativne vrednosti imunoglobulinov G, A, M, to kaže na začetno fazo razvoja patološkega procesa ali njegovo odsotnost. Ta rezultat se zabeleži po popolnem okrevanju po terapiji.

Negativen izvid IgM in IgA ter pozitiven izvid IgG pomenita nastanek imunosti po preboleli nalezljivi bolezni ali cepljenju.

Pozitiven rezultat IgM in negativen ali pozitiven rezultat IgG, IgA kaže na prisotnost akutne nalezljive patologije.

Analiza ELISA se izvede precej hitro, rezultati so pripravljeni v enem dnevu po zbiranju materiala.

Encimski imunski test krvi je diagnostična metoda, ki se uporablja za identifikacijo helmintov pri otrocih in odraslih.

Indikacije za uporabo

Zdravniki predpisujejo ELISA za invazijo v naslednjih primerih:

  • število levkocitov pri bolniku znatno presega normo v odsotnosti simptomov drugih patologij;
  • vas mučijo pogoste vrtoglavice ali glavoboli brez očitnega razloga;
  • pojavijo se alergijske reakcije;
  • premagajo bolečine v mišicah, izguba moči;
  • kašelj se dolgo ne pozdravi;
  • včasih se pojavi febrilno stanje;
  • pri domačih živalih se odkrije prisotnost črvov;
  • epidemiološka situacija v regiji stalnega prebivališča se poslabša;
  • Pacientov poklic je povezan z velikim tveganjem okužbe s črvi (izvaja se rutinska diagnostika).

  • prebavne motnje s spremembami blata in njegove pogostosti;
  • bolečine v trebuhu;
  • kolike v območju jeter;
  • slabost, ki se spremeni v bruhanje;
  • znaki poškodb centralnega živčnega sistema: nespečnost, povečana živčnost, nenadne spremembe razpoloženja.

Vrste ELISA

Encimska reakcija vam omogoča preučevanje vrst helminthov, ki jih identificirajo laboratorijski pomočniki, z vizualnim merjenjem podatkov o njih.

V laboratorijih se izvajajo različne vrste ELISA:

Kako jemati

Da bi bili rezultati raziskav čim bolj zanesljivi, je treba dosledno upoštevati vse laboratorijske zahteve. Potrebno:

  • 3 dni pred darovanjem krvi prenehajte jemati vsa zdravila, razen vitalnih;
  • prekinite fizioterapevtske postopke 2 dni vnaprej;
  • opustite alkohol in kavo 1 dan prej;
  • dan prej ne bodite izpostavljeni telesni aktivnosti ali čustvenemu stresu;
  • večerjajte najkasneje 19-20 ur (zjutraj lahko popijete nekaj vode).

Dekodiranje

Možnost #1. IgM-, IgA+, IgG-: primarna bolezen (2 tedna od trenutka okužbe).

Možnost št. 2. IgM+, IgA+, IgG-: primarna bolezen (2,5-3 tedne od okužbe).

Možnost #3. IgM+, IgA+, IgG+: primarna okužba (3-4 tedne od trenutka okužbe).

Možnost številka 4. IgM-, IgA+, IgG+: poslabšanje kronične bolezni (2 tedna od začetka poslabšanja).

Možnost št. 5. IgM-, IgA+/-, IgG+: kronična faza.

Možnost številka 6. IgM-, IgA-, IgG+: ozdravljena (pretekla) okužba, prisotnost imunosti.

Možnost št. 7. IgM-, IgA, IgG niso odkriti (ali se titer zmanjša za 2-4 krat na koncu zdravljenja, za 5-8 krat 1-1,5 meseca po zdravljenju): okrevanje.

Možnost št. 8. IgM-, IgA-, IgG-: pomanjkanje imunosti na okužbo.

Prednosti in slabosti

Zelo redko je, da test povzroči lažno pozitivne ali lažno negativne rezultate. Ta pomanjkljivost je lahko posledica tehničnih napak. Takšni rezultati so možni pri revmatoidnem faktorju, presnovnih motnjah in drugih kroničnih boleznih, ki povzročajo nastajanje zaščitnih protiteles, pa tudi pri jemanju nekaterih zdravil, na primer insulina.

Metoda ELISA določa:

  • trakulje (svinjske trakulje);
  • okrogli črvi (okrogli črvi, pinworms, toxocara, strongyloiditis);
  • ploščati črvi (cestodi, metljaji, nematode);
  • trihinela;
  • za okrogle črve – 935 rubljev;
  • za toksoplazmozo - 715-1000 rubljev.

ELISA (encimsko-imunski test, ELISA) je v praktično medicino vstopil nekje v 60. letih prejšnjega stoletja. Njegova začetna naloga je bila histološka raziskava v znanstvene namene, ki se je zvodila na iskanje in identifikacijo antigenske strukture celic živega organizma.

Metoda ELISA temelji na interakciji specifičnih (AT) in sorodnih antigenov (AG) s tvorbo kompleksa "antigen-protitelo", ki se zazna z encimom. To dejstvo je znanstvenike spodbudilo k razmišljanju, da je mogoče metodo uporabiti v diagnostične namene za identifikacijo specifičnih imunoglobulinov različnih razredov, ki sodelujejo pri imunskem odzivu na določeno okužbo. In to je bil preboj v klinični laboratorijski diagnostiki!

Metoda se je začela aktivno uporabljati šele v zgodnjih 80. letih, in to predvsem v specializiranih ustanovah. Prvi imunoencimski analizatorji so bili opremljeni s centri in postajami za transfuzijo krvi, infekcijskimi in venerološkimi bolnišnicami, saj se je na našem obzorju pojavil grozoviti AIDS, rojen na afriški celini, ki se je takoj pridružil "starim" okužbam, zahteval takojšnje diagnostične ukrepe in iskanje za terapevtska zdravila, ki vplivajo nanj.

Področje uporabe metode ELISA

Možnosti encimskega imunskega testa so resnično široke. Zdaj si je težko predstavljati, kako bi lahko brez takšnih raziskav, ki se uporabljajo v dobesedno vseh vejah medicine. Zdi se, kaj lahko ELISA naredi v onkologiji? Izkazalo se je, da lahko. In veliko. Sposobnost analize, da najde označevalce, značilne za določene vrste malignih novotvorb, je osnova za zgodnje odkrivanje tumorja, ko zaradi svoje majhnosti še ni določen z nobeno drugo metodo.

Sodobna klinično laboratorijska diagnostika (CDL) ima poleg tumorskih označevalcev precejšen arzenal ELISA plošč in jih uporablja za diagnosticiranje različnih patoloških stanj (infekcijskih procesov, hormonskih motenj) in spremljanje farmacevtskih zdravil, da bi ugotovili njihov učinek na bolnikovo telo. in, mimogrede, ne samo človek. Trenutno se encimski imunski test pogosto uporablja v veterinarskih službah, saj so tudi "naši mlajši bratje" dovzetni za številne bolezni, zaradi katerih včasih zelo trpijo.

torej ELISA lahko zaradi svoje občutljivosti in specifičnosti iz vzorca krvi iz vene določi:

  • Hormonsko stanje (ščitnični in nadledvični hormoni, spolni hormoni);
  • Prisotnost virusnih in bakterijskih okužb (HIV, B in C, klamidija, sifilis in, ter številne druge bolezni, ki jih povzročajo patogeni mikroorganizmi);
  • Sledi vitalne aktivnosti mikroorganizmov, ki so sprožili infekcijski proces, ki se je uspešno končal in prešel v fazo oblikovanja imunskega odziva na tega patogena. Takšne sledi, torej protitelesa, v mnogih primerih ostanejo v krvi krožiti vse življenje in s tem človeka zaščitijo pred ponovno okužbo.

Kaj je bistvo ELISA?

Metoda encimskega imunskega testa omogoča določanje ne le prisotnosti samega patogena (kvalitativna analiza), temveč tudi njegovo kvantitativno vsebnost v krvnem serumu pacienta.

Virusna ali bakterijska doza pomembno vpliva na potek infekcijskega procesa in njegov izid, zato ima kvantitativna analiza pomembno vlogo pri diagnostiki in zdravljenju bolezni v različnih oblikah in fazah.

Vendar pa ob poznavanju študij encimskega imunskega testa, kot je metoda ELISA, sploh ne pomislimo, kako uspeva zajeti tako širok spekter mikroorganizmov, ki naseljujejo naš planet, od katerih mnogi neposredno ogrožajo zdravje in življenje ljudi in živali. Dejstvo pa je, da ima ELISA veliko možnosti (nekonkurenčne in konkurenčne – neposredne in posredne), od katerih vsaka rešuje svoj problem in s tem omogoča ciljno iskanje.

Za identifikacijo imunoglobulinov enega ali drugega razreda se uporablja tradicionalna polistirenska plošča (plošča) s 96 vdolbinicami, v vdolbinicah katere so koncentrirani sorbirani rekombinantni proteini v trdni fazi. Protitelesa ali antigeni, ki pridejo v vdolbino s krvnim serumom, najdejo "znan" predmet in z njim tvorijo kompleks (AG - AT), ki se, fiksiran z encimskim konjugatom, pojavi kot sprememba barve vdolbinice pri branju. rezultate.

Encimski imunski test se izvaja s testnimi sistemi določene specifičnosti, izdelanimi v posebnih laboratorijih in opremljenimi z vsemi potrebnimi reakcijskimi komponentami. Raziskave se lahko izvajajo s pralnimi stroji (»pralci«) in bralnimi spektrofotometri, ki večinoma vključujejo ročno delo. Na popolnoma avtomatiziranih strojih, ki laboranta osvobodijo monotonega vkapavanja, pranja in drugih rutinskih opravil, je seveda delo hitrejše in udobnejše, vendar si vsi laboratoriji ne morejo privoščiti takšnega razkošja in delati naprej po starem – na polavtomatski stroji.

Interpretacija rezultatov ELISA je v pristojnosti zdravnika laboratorijske diagnostike, pri čemer je treba upoštevati tudi inherentno lastnost skoraj vseh imunokemijskih reakcij, da dajejo lažno pozitivne ali lažno negativne odgovore.

Video: sodobni encimski imunski test

Rezultati ELISA na primeru sifilisa

Encimski imunski test je primeren za odkrivanje vseh oblik, poleg tega pa se uporablja v presejalnih študijah. Za izvedbo analize se uporabi pacientova venska kri, odvzeta na prazen želodec. Pri delu se uporabljajo tablete z določeno specifičnostjo (AB razredi A, M, G) ali totalna protitelesa.

Glede na to, da se protitelesa pri sifilisu proizvajajo v določenem zaporedju, lahko ELISA zlahka odgovori na vprašanje, kdaj je prišlo do okužbe in v kateri fazi je proces, interpretacijo dobljenih rezultatov pa lahko predstavimo v naslednji obliki:

  • IgM označuje trajanje infekcijskega procesa (lahko se pojavi med poslabšanjem kroničnih vnetnih bolezni);
  • IgA navaja, da je do okužbe prišlo pred več kot mesecem dni;
  • IgG kaže, da je okužba v polnem razmahu ali da je bilo zdravljenje pred kratkim opravljeno, kar je enostavno ugotoviti z anamnezo.

Pri testiranju na sifilis ostanejo negativne vdolbinice (in negativna kontrola) brezbarvne, medtem ko bodo pozitivne vdolbinice (in pozitivna kontrola) svetlo rumene barve zaradi spremembe barve kromogena, dodanega med testom. Intenzivnost barve pa ne sovpada vedno s kontrolo, to je lahko nekoliko bolj bleda ali rahlo rumenkasta. To so dvomljivi rezultati, ki jih je praviloma treba ponovno pregledati z obveznim upoštevanjem kvantitativnih kazalcev, pridobljenih na spektrofotometru, na splošno pa je barva neposredno sorazmerna s številom imunskih kompleksov (povezanih Ag in AT) .

Najbolj vznemirljiv encimski imunski test je HIV ELISA

Analiza je morda bolj kot druge zanimiva za širok krog prebivalstva, saj še vedno ni mogoče z gotovostjo trditi, da so številni družbeni problemi izginili (prostitucija, zasvojenost z drogami itd.). Na žalost HIV ne prizadene le teh slojev človeške družbe; okužiti se je mogoče v različnih okoliščinah, ki niso povezane s spolno nemoralnostjo ali uživanjem drog. Če pa je potreben test na HIV, se ne smete bati, da bodo vsi okoli vas vedeli za vaš obisk takšnega laboratorija. Zdaj so okuženi z virusom HIV zaščiteni z zakonom in tisti, ki dvomijo, se lahko obrnejo na anonimne pisarne, kjer lahko rešijo težavo brez strahu pred javnostjo in obsojanjem.

Metoda encimskega imunskega testa za diagnosticiranje okužbe s HIV je ena najpomembnejših standardnih študij, ki pa zahteva posebne pogoje, saj je tema zelo občutljiva.

HIV ELISA je smiselno opraviti po spolnem stiku, transfuziji krvi, drugih medicinskih posegih, ki kažejo na okužbo, in ob koncu inkubacijske dobe (»seronegativno okno«), vendar je treba upoštevati, da je to obdobje ni konstantno. Lahko se konča v 14-30 dneh ali pa traja do šest mesecev, zato se za povprečno vrednost šteje interval od 45 do 90 dni. Krv za HIV se daruje na enak način kot za druge okužbe - iz vene na prazen želodec. Izvidi bodo pripravljeni glede na nakopičenost materiala v laboratoriju in njegovo obremenjenost (od 2 do 10 dni), čeprav največkrat laboratoriji dajo odgovor še isti ali naslednji dan.

Kaj lahko pričakujete od rezultatov za HIV?

ELISA za okužbo s HIV zazna protitelesa proti dvema vrstama virusa: HIV-1 (pogostejši v Rusiji in drugih državah Evrope in Azije) in HIV-2 (pogostejši v Zahodni Afriki).

Naloga testa HIV ELISA je iskanje protiteles razreda G, ki jih odkrijejo vsi testni sistemi, vendar kasneje, ter protiteles razreda A in M, odkritih na rekombinantnih testnih kompletih nove generacije, ki omogočajo odkrivanje protiteles. v najzgodnejših fazah (inkubacijska doba - "seronegativno okno"). Od testa ELISA lahko pričakujete naslednje odgovore:

  1. Primarni pozitiven rezultat: kri je treba ponovno testirati s testnim sistemom iste vrste, vendar po možnosti druge serije in s strani druge osebe (laborant);
  2. Ponovljeni (+) vključuje nov odvzem krvi od pacienta z njegovim pregledom, podobnim primarni analizi;
  3. Drug pozitiven rezultat je predmet referenčne analize, ki uporablja visoko specifične testne komplete (2-3 kosi);
  4. Pozitiven rezultat v obeh (ali treh) sistemih se pošlje na imunobloting (isti ELISA, vendar izveden individualno z uporabo testnih kompletov s posebno visoko specifičnostjo).

Zaključek o okužbi z virusom HIV se naredi le na podlagi imunoblotinga. Pogovor z okuženo osebo poteka v popolni zaupnosti. Razkritje zdravniške skrivnosti v Rusiji, pa tudi v drugih državah, je kazensko kaznovano.

Posebno priljubljenost so pridobili tudi testi za klamidijo in citomegalovirus z metodo encimskega imunskega testa, saj omogočajo določitev časa okužbe, stopnje bolezni in učinkovitosti ukrepov zdravljenja.

Med izvajanjem lahko opazimo tudi pojav protiteles različnih razredov. v različnih fazah patološkega stanja, ki ga povzroča povzročitelj okužbe:

  • IgM lahko odkrijemo že sedem dni po okužbi;
  • IgA kaže, da okužba živi v telesu več kot mesec dni;
  • IgG potrdi diagnozo klamidije in pomaga spremljati zdravljenje ter ugotavljati njegovo učinkovitost. Treba je opozoriti, da protitelesa razreda G ostanejo in krožijo v telesu ne glede na trajanje bolezni, zato morate za pravilno razlago analize upoštevati referenčne vrednosti (norme), ki so mimogrede , so različni za vsak CDL: ob upoštevanju znamke testnega sistema in specifičnosti reagentov, vključenih v komplet. Normalne vrednosti so vpisane v obrazec poleg rezultata ELISA.

Kar se tiče, je tukaj malo drugače: protitelesa razreda M se pojavijo po približno mesecu do mesecu in pol, to pomeni, da pozitiven rezultat (IgM+) postane v fazi primarne okužbe ali med reaktivacijo latentne okužbe in tako ostane od 4 mesecev do šest mesecev.

Prisotnost protiteles razreda G je značilna za pojav primarne akutne okužbe ali ponovne okužbe. Analiza navaja, da je virus prisoten, ne daje pa podatka, v kateri fazi je infekcijski proces. Medtem pa določanje normalnega titra IgG povzroča tudi težave, saj je v celoti odvisno od imunskega statusa določene osebe, ki pa se ugotavlja z identifikacijo imunoglobulinov razreda G, pri diagnosticiranju CMV obstaja potreba oceniti sposobnost protiteles razreda G za interakcijo s CMV, da bi ga kasneje "nevtralizirali" (avidnost AT). V začetni fazi bolezni se IgG zelo slabo veže na virusne antigene (nizka avidnost) in šele nato začne kazati aktivnost, zato lahko govorimo o povečani avidnosti protiteles.

O prednostih encimskega imunskega testa lahko govorimo veliko, saj je ta metoda uspela rešiti številne diagnostične težave samo z uporabo venske krvi. Ni potrebe po dolgem čakanju, skrbeh in težavah z zbiranjem materiala za raziskavo. Poleg tega se testni sistemi za ELISA še naprej izboljšujejo in ni daleč dan, ko bo test dal 100% zanesljiv rezultat.

Video: izobraževalni film Moskovske državne medicinske univerze poimenovan po. Sechenov o osnovah ELISA

Okužba z virusom humane imunske pomanjkljivosti je resna diagnoza. Napake pri diagnozi lahko povzročijo katastrofalne posledice. Test ELISA za HIV je najbolj dostopna raziskovalna metoda, vendar ni v vseh primerih informativen.

ELISA - encimski imunski test. Namen metode ELISA je odkrivanje protiteles proti virusu imunske pomanjkljivosti v biološkem materialu. Z uporabo metode lahko sledite prisotnosti v tekočini ne samih virusov, temveč le protiteles, ki nastanejo kot odgovor na njihovo prisotnost. Encimski imunski test se pogosto uporablja pri diagnozi spolno prenosljivih bolezni. Pomaga pri prepoznavanju spolno prenosljivih bolezni.

Obstaja več vrst ELISA: direktna različica, indirektna različica, sendvič metoda. Vsekakor pa tehnika temelji na ugotavljanju prisotnosti protiteles, ki služijo kot pokazatelj prodora tujka. Za identifikacijo teh "oznak" se biološka komponenta obdela z encimi.

Encimski imunski test določa protitelesa z natančnostjo 96–98%, napaka je nepomembna. Je 2-4%.

ELISA - metoda za diagnosticiranje HIV

Test ELISA za HIV je prva stopnja diagnoze. Antigeni virusa imunske pomanjkljivosti so proteini p24, p15, p17, p31 in glikoproteini gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Za odkrivanje virusnega proteina se vzame vzorec krvi iz vene. Vzorec, poslan na testiranje krvi ELISA, se obdela z reagenti za encimski imunski test. Serum izoliramo iz krvi. Če jih med študijo najdemo, to pomeni, da je virus že prisoten v krvi.

Krv se daruje strogo na prazen želodec. 2 dni pred testom ni priporočljivo jesti mastne hrane in piti alkohola. Za 14 dni morate prenehati jemati protivirusna zdravila.

Prednosti metode:

  • relativno nizki stroški;
  • visoka stabilnost reagentov;
  • visoka občutljivost;
  • kratko trajanje;
  • minimalen vpliv človeškega faktorja.

Sodobni testni sistemi ELISA so izdelani v skladu z mednarodnimi standardi. To poveča natančnost metode.

Encimski imunski test ne daje vedno zanesljivih rezultatov. Ko virus vstopi v kri, se začne latentna (skrita) stopnja razvoja. Obdobje, preden se virusi začnejo razmnoževati in protitelesa še niso nastala, se imenuje "seronegativno okno". Na tej stopnji nima smisla izvajati ELISA. Če pride do okužbe, bo rezultat . Kako hitro se virus razkrije, je odvisno od tega, koliko nevarnih celic je vstopilo v telo. V primeru nezaščitenega spolnega odnosa ali transfuzije okužene krvi bo to obdobje minimalno.

Za visoko zanesljivost HIV ELISA se test izvede trikrat. Roki za opravljanje testa ELISA za virus humane imunske pomanjkljivosti:

  • 6 tednov po verjetnem stiku,
  • v 3 mesecih,
  • šest mesecev kasneje.

ELISA 4. generacije za HIV je metoda, ki je najbolj informativna v zgodnjih fazah okužbe. Lahko se izvaja že 1 mesec po sumu okužbe. Preizkus je drag v primerjavi z analogom 3. generacije. Zato se v javnih zdravstvenih ustanovah uporablja kot dodatna diagnostična metoda. Test 3 se opravi brezplačno. Če na podlagi njegovih rezultatov ni mogoče podati dokončnega odgovora, se pacienta napoti na test ELISA 4. generacije.

Pomembno!Človek postane kužen takoj po okužbi. Nevaren je za druge, tudi ko še ne ve za svojo diagnozo!

Če ELISA odkrije protitelesa proti antigenom HIV, je treba opraviti dodatne študije. To vključuje. Zanesljivost te metode je 80%. PCR test krvi, semena in izcedka iz nožnice. Biološka tekočina se razgradi v medicinskem reaktorju in nato obdela z encimi. Posledično dobimo podatke o koncentraciji celic HIV v tekočem mediju. Zaradi velike napake (20 %) se ob pozitivnem rezultatu dodatno opravi še imunobloting.

Naslednja stopnja diagnoze je Combo test (ali imunobloting). To je zelo občutljiv test (98% zaupanje), ki se izvede, če so rezultati ELISA po 6 mesecih dvoumni.

Dekodiranje rezultatov ELISA

Čas dešifriranja je od 24 do 48 ur. Če je potrebno nujno pridobiti informacije (potrebna je operacija), se dekodiranje izvede v 2 urah. Pokrajinski zdravstveni centri nimajo vedno potrebnih reagentov. Vzorec se odvzame na mestu prijave, nato se prenese v regijski center. V takih okoliščinah je rezultat viden v 1-2 tednih.

Rezultat encimskega imunskega testa je lahko pozitiven ali negativen; Drugih možnosti ni.

Tudi če so bili začetni in ponovljeni rezultati ELISA pozitivni, bolnika ni mogoče prepoznati kot okuženega s HIV. Pridržujemo si pravico do napak. Vzroki za lažno pozitiven rezultat:

  • kronične bolezni;
  • dolgotrajne nalezljive bolezni;
  • nosečnost.

Zato je treba rezultat analize pojasniti z dodatnimi študijami.

Če je imunobloting HIV pozitiven (reaktiven), se oseba šteje za okuženo s HIV, kar pomeni, da je zdrava.

Sčasoma se virusne celice prilagodijo predpisanim zdravilom. Za nadzor se test ELISA periodično ponavlja.

Včasih imunobloting pokaže lažno negativen rezultat. Zelo redko je, da imate virus imunske pomanjkljivosti 6 mesecev (ali več). To je mogoče, če majhna količina virusnih celic vstopi v kri. V 0,5 % vseh primerov lahko okužbo ugotovimo šele po enem letu. V 99,5 % šestih mesecih po okužbi bo test ELISA dal zanesljiv rezultat.

Tudi pri zelo natančnih študijah ostaja 2-odstotna možnost napake. Ne smemo pozabiti na človeški faktor. Da bi odpravili možnost napake, lahko test opravite v 2 različnih ustanovah.